1. 用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架好梳子; 2. 根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般 20~30 ml); 3. 放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加入一滴荧光染料,轻轻旋转以充分混...
3️⃣ 配制凝胶:根据需要分离的DNA片段大小,用电泳缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖溶液。准确称量琼脂糖干粉,加入定量的电泳缓冲液中。将混合物放入微波炉内加热熔化,充分摇匀,重复3-5次直至琼脂糖完全融化。稍冷却后,加入适当比例的核酸染料,摇匀。 注意事项: 总液体量不宜超过锥瓶的50%容量。 加热过程中要不时摇...
设定凝胶运行的时间和电压,调节电压至4-5V/cm,DNA从负极移到正极,电泳时间30-60 min,具体根据凝胶比例和片段大小进行调整(一般120V,35 min即可)。电泳结束后,拔掉电源。 常见问题分析: 1.加样孔有荧光 (1)提DNA时有蛋白质残留。 (2)基因组DNA,如果使用普通的琼脂糖电泳,往往不能电泳出孔,滞留在加样孔中产...
(1)制备琼脂糖凝胶：检查凝胶模具是否完好，选择加样孔径大小适宜的梳板，垂直架在 模具的一端，使梳板底部离模具水平面的距离为1.0mm左右。按照被分离的DNA分子的大小决 定凝胶中琼脂糖的百分含量。(2)称取一定量的琼脂糖，溶解在×1 TAE电泳缓冲液中，置微波炉中加热至琼脂糖溶化均匀(如果配制浓度为1%的琼...
②操作过程中应避免产生气泡,以免影响电泳结果。 ③微波炉加热琼脂糖时需小心操作,以防突然产生气泡导致溢出。 ④EB等核酸染料具有毒性,操作时应佩戴防护手套。 ⑤电泳缓冲液多次使用后应及时更换,以免影响电泳效果。 通过以上步骤,可以完成琼脂糖凝胶电泳实验,对DNA片段进行分离、鉴定和纯化。
需要时不时取出搅拌,以帮助琼脂糖的溶解。 将溶液冷却至可以手持的温度后,加入适量的EtBr(如果使用的是预染色法)。 将混合液混匀后倒入电泳槽的模具中,插入梳子形成样品槽,待凝胶凝固。📋 加样: 在凝胶凝固后,将电泳槽放入电泳仪中,加入TAE缓冲液,使凝胶完全浸没。电泳缓冲液的量需要足够,以保证电流可以顺利...
琼脂糖凝胶电泳 一、步骤：1、制胶(1%)：将加入30ml 1×TAE缓冲液和0.6g琼脂糖的三角瓶在微波炉加热至沸腾，摇匀至无颗粒。2、倒胶：先插梳子，再倒胶。胶冷却至60℃左右(不烫手)加染料后（胶-GelRed:1ml-1ul或30ml胶+3ulGelRed）缓缓倒入电泳槽 (先胶布封口，放好梳子)，待胶凝固后取出梳子。3、加...
写出琼脂糖凝胶电泳的操作步骤。相关知识点: 试题来源: 解析 胶液的制备:称取适量琼脂糖,进入50ml的 1×TAE 稀释缓冲液,熔化,混匀。 胶板的制备:冷却至50~60 0 C,加入染料,混匀。倒入电泳槽,凝固,拔出梳子。加稀释缓冲液。 加样 : 取2-5 m l 样品加1 m l 的上样缓冲液,用移液枪混匀,小心加到...
- Tanon凝胶成像仪 实验步骤：1. 用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净，放在制胶平板上，并封闭模具边缘，安装好梳子。2. 根据所需分离的DNA片段大小，配制适宜浓度的琼脂糖凝胶缓冲液。准确称量所需量的琼脂糖干粉，加入到三角烧瓶中，然后加入适量的电泳缓冲液（一般20~30 ml）。3. 将三角烧瓶放入微波炉中加热...
琼脂糖凝胶电泳是一种通过电场的作用来实现分离和鉴定核酸和蛋白的方法。1. 配置1x TAE 电泳缓冲液:量筒量取 50x TAE 缓冲液 20ml,量筒量取超纯水 980ml,搅拌均匀后倒入电泳槽。2. 配制琼脂糖凝胶(根据需要分离的核酸片段大小选着合适的浓度,例1%浓度):天平称取琼脂糖 35g,量筒量取超纯水 35ml,并和琼脂糖...