利用优化后的反应体系和反应条件,将猪A群轮状病毒的RNA进行10倍倍比稀释至1×10-5,即浓度分别为13 170,1 317,131.7,13.17,1.317,0.131 7 pg/μL,然后进行RT-PCR扩增,以检测该方法的敏感性。 2.5、重复性与稳定性试验 利用优化后的反应体系和反应程序,分3次提取猪A群轮状病毒的RNA,并平行进行3次RT-PCR...
猪轮状病毒病病毒RT-PCR检测方法 1范围 本标准规定了猪轮状病毒检测方法的试剂仪器设备操作程序 RT-PCR、、。 本标准适用于猪临床样品新鲜粪便和小肠及细胞培养物中猪轮状病毒核酸的检测 ()。 2缩略语 下列缩略语适用于本文件 。 鸟类病毒反转录酶
I GB/T 34756—2017 猪轮状病毒病 病毒RT-PCR检测方法 1范围 本标准规定了猪轮状病毒RT-PCR检测方法的试剂、仪器设备、操作程序。 本标准适用于猪临床样品(新鲜粪便和小肠)及细胞培养物中猪轮状病毒核酸的检测。 2缩略语 下列缩略语适用于本文件。 AMV:鸟类 RNA 病毒反转录酶(avian myeloblastosis virus) ...
猪轮状病毒A组(PRV-A)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)用特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用一步法荧光 RT-PCR 技术对猪轮状病毒A组(PRV-A)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)RNA 进行体外扩增检测,不同批号的试剂盒组分不可交互使用,此试剂盒仅供科研使用。
【检测方法】RT-PCR 荧光探针法 【检验原理】 本试剂盒用特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用一步法荧光 RT-PCR 技术对猪轮状病毒A组(PRV-A)RNA 进行体外扩增检测,仅用于科研使用。 【试剂组成】 名称 规格 酶液 50μl×1 管 反应液 1.0ml×1 管 ...
检测方法:荧光RT-PCR 产品规格:50T 保存条件:-20℃±5℃,避光保存 有效期:12个月 产品介绍 【产品名称】猪轮状病毒A型荧光RT-PCR 检测试剂盒(荧光RT-PCR法) 【包装规格】50T/盒 【预期用途】 本试剂盒适用于检测的扁桃体、淋巴结等组织病变部与健康部交界处组织、全血等标本中猪轮状病毒A型RNA,适用于猪轮...
6)目的mRNA中含有强的转录中止位点,可以试用以下方法解决: a. 将第一链的反应温度提高至50℃。 b. 使用随机六聚体代替Oligo(dT)进行第一链反应。 3. 产生非特异性条带 1) 用RT阴性对照检测是否被基因组DNA污染。如果RT阴性对照的RT-PCR结果也显示同样条带,则需要用DNase I重新处理样品。 2) 在RT-PCR反应...
TaqMan荧光定量RT-PCR为建立灵敏,特异的G9型猪轮状病毒(PoRV) TaqMan的荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的G9型PoRV NMTL株的VP7基因保守区域设计一条特异性引物和探针.以104 TCID50的病毒液所提取的总RNA进行10倍系列稀释作为标准品,通过对反应条件进行优化,建立了检测G9型PoRV的TaqMan荧光定量RT...
3.2.10 RNA反转试剂盒,一20 咆>-- 种引物对付 3.3 辑材 3.3.1 Eppendorf( 3.3.2 PCR 管。 3.3.3 吸头。 检测 果观察区. 4.1.1.2 采样要求 应采集出现腹泻症状 1 2、割让时 乳最佳〉。采集母猪乳汁前要对乳 该组织(防止肠内容物流出〉,将其全部放入样曲 品避免接触甲醒或高温,以免降低检出率。
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。 【核酸提取】 推荐采用上海烜雅生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂(磁珠法或离心柱法)进行核酸提取,请按照试剂说明书进行操作。 1. 试剂配制(试剂准备区) ...