热启动Taq酶在高温下被激活,从而在PCR反应的初始阶段提高了酶的活性,并在模板DNA的嵌合期间增加了反应的特异性。热启动技术提高了PCR反应的选择性、灵敏度和特异性,从而可以获得更精确的PCR产物。3、增加PCR反应的稳定性 热启动Taq酶的活性在高温下被激活,可以提高PCR反应的稳定性。这种活性的提高可确保反应在早...
Hieff UNICON®Taq抗体与Hieff®Taq DNA Polymerase具有很高的亲和力,高温50℃处理30 min,依旧可以封闭Hieff®Taq DNA Polymerase的活性。本品在预变性温度下加热30 sec完全失活,释放出DNA聚合酶活性。使用该热启动Taq酶可以有效抑制引物非特异性退火导致的扩增。
翌圣生物开发的热启动Taq酶双封闭抗体不仅可以封闭Taq酶的有5'→3'聚合酶活性,还能同时封闭Taq酶的5'→3'外切酶活性,双管齐下,既能有效防止错配或引物二聚体引起的非特异性扩增,又能防止物料降解产生非特异信号,双重提升试剂的稳定性。 图1. 翌圣双封闭抗体封闭原理示意图 图中高亮部分为Taq DNA聚合酶5'→3'...
如今经历了十余年的发展,国产Taq酶封闭抗体品质大幅提升,比如厦门同仁心生物研发的双封闭热启动Taq DNA聚合酶,已成了国内IVD企业降成本替换进口的优选。 厦门同仁心生物研发的TRX Taq V2采用双封闭抗体法修饰,TRX Taq V2经过抗体法修饰,常温下聚...
Ø 选择酶动力强的热启动Taq酶 热启动Taq酶的酶动力与扩增效率有关。一般热启动Taq酶的酶动力越强,PCR扩增的指数增长期越长,“S”型曲线更加典型,荧光信号值更高,而且更适合做多重PCR检测。 Ø 选择灵敏度高的热启动Taq酶 一般来说,热启动Taq酶的扩增效率高,灵敏度就高,但也有不一致的情况。如果要扩增...
我们实验室对国内常用品牌的热启动Taq酶曾经进行过比较,将人RNase的一个片段质粒5倍梯度稀释,将qPCR结果做成标准曲线,结果ABI和Starvio热启动Taq酶扩增效率都在95%以上,每反应体积能够检测的最低量可达2pg(如图1),而某国际知名品牌T的热启动Taq酶的扩增效率只有90%,在模板量为2pg时无扩增曲线。
热启动Taq酶的酶动力与扩增效率有关。一般热启动Taq酶的酶动力越强,PCR扩增的指数增长期越长,“S”型曲线更加典型,荧光信号值更高,而且更适合做多重PCR检测。 Ø选择灵敏度高的热启动Taq酶 一般来说,热启动Taq酶的扩增效率高,灵敏度就高,但也有不一致的情况。如果要扩增的样本目标基因丰度较低,建议对Taq酶...
Ø 选择酶动力强的热启动Taq酶 热启动Taq酶的酶动力与扩增效率有关。一般热启动Taq酶的酶动力越强,PCR扩增的指数增长期越长,“S”型曲线更加典型,荧光信号值更高,而且更适合做多重PCR检测。 Ø 选择灵敏度高的热启动Taq酶 一般来说,热启动Taq酶的扩增效率高,灵敏度就高,但也有不一致的情况。如果要扩增...
图一:热启动原理 热启动Taq酶的应用 PCR能够快速特异的扩增任何已知的DNA片段,因此被广泛的应用于分子生物学的各个领域。Relia热启动酶因具有5’-3’核酸外切酶活性,可用于荧光定量PCR反应。采用热启动法扩增是提高PCR特异性的常用方法,热启动酶是很好的选择。除此之外,因其具有的高特异性高灵敏度被广泛应用到...
热启动Taq酶由于能够很好的解决PCR中常出现的非特异性扩增、引物二聚体形成等问题,同时有效提高了目标基因的扩增成功率及产率,因而一直以来都备受科研人员的青睐。而一种扩增效率高、酶动力强、灵敏度高的热启动Taq酶对后续的实验更是能起到积极的作用。