1、原理:纤维素经纤维素酶水解后生成还原糖,还原糖能将3,5一二硝基水杨酸中硝基还原成氨基,溶液变为橙色的氨基化合物,即:3一氨基一5二硝基水杨酸,在一定的还原糖浓度范围内,橙色的深度与还原糖的浓度成正比,据此可以推算出纤维素酶的活力。 2、采用的滤纸酶活单位定义: 滤纸酶活反映了纤维素酶的3种水解酶,即...
滤纸酶活反映了纤维素酶的3种水解酶，即内切型葡聚糖酶、外切型葡聚糖酶和β葡聚糖苷酶组成的诱导复合酶系的协同水解纤维素能力。是该菌株整个纤维素酶系的酶活力水平的综合体现。代表了纤维素酶的三种酶组分协同作用后的总酶活。在此...
1、检测纤维素酶酶活力一滤纸酶活力(FPA)滤纸酶活力代表了纤维素酶的三种酶组分协同作用后的总酶活。采用3,5二硝基水杨酸法测定酶活:(简称DNS!)1原理:纤维素经纤维素酶水解后生成还原糖,还原糖能将3,5二硝基水杨酸中硝基还原成氨基,溶液变为橙色的氨基化合物, 即: 3氨基一 5二硝基水杨酸,在一定的还原糖浓...
为:以滤纸为底物,在一定反应条件(pH4.8,50℃,恒温lh)下,以水解反应中,1ml纤维 素酶液1min催化纤维素生成lug葡萄糖为1个滤纸酶活单位,以U表示。 3、滤纸酶活力(FPA)的测定: ①取0.5ml适当稀释的酶液,加入PH值为4.8,0.1mol/L的乙酸-乙酸钠缓冲液lml或 ...
滤纸酶活测定主要依据纤维素酶水解滤纸产生还原糖的数量,因此,首先要进行绘制葡萄糖标准曲线。 (1)测定葡萄糖含量的标准曲线绘制 制作葡萄糖标准曲线方法见表1: 葡萄糖(ml) 去离子水(ml) DNS(ml) 反应体系中葡萄糖浓度(mg/ml) 0 1.5 3 0 0.1 1.4 3 0.067 0.2 1.3 3 0.133 0.3 1.2 3 0.200 0.4 1.1 ...
滤纸法酶活测定 1.接种,根据不同的菌种配所需的培养基,本实验中C24,M1,MM01,BJJ,MQM为PDA培养基,F8,FN6,FN7.FN10,FN11,FN12,FN*,C10为LB培养基。在无菌条件下将其接种于以灭菌的液体培养基里,每个菌种做三个重复。 2.培养,将其放置于相同环境摇菌培养,适宜温度为28℃左右,边培养边观察生长情况。 3...
滤纸 (定性 ) 、羧 甲基纤 维素钠 (试剂级 ) . 1. 2 FPA 滤纸酶活和 CMC 酶活的测定 取适 当稀释的酶液 , 分别以滤纸或 1% CMC 溶液 为底 物,于50cc 恒 温水 解反 应 1 h, 然后 加 入显 色剂 DNS, 沸水 浴 中煮沸 5min, 再加入蒸馏水 ,于530nm 测定 吸光度 OD 值 .酶活 定义 :...
滤纸酶活(FPA)测定方法 原理: 3,5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的 量和反应液的强度成比例关系,利用分光光度计测出其在530nm处的吸光度,得出还原糖的量。滤纸是聚合度和结晶度都居“中等”的纤维性材料,以其为底物经纤维素酶水解后生成还原糖的量来表征纤维素...
1、纤维素酶一般至少由三种以上的酶组成,因此其综合酶活力测定一般用滤纸 酶活来表示。滤纸酶活测定主要依据纤维素酶水解滤纸产生还原糖的数量,因此, 首先要进行绘制葡萄糖标准曲线。(1)测定葡萄糖含量的标准曲线绘制制作葡萄糖标准曲线方法见表1:表1葡萄糖标准曲线葡萄糖(ml)去离子水(ml)DNS(ml)反应体系中葡萄糖...
采用3,5一二硝基水杨酸法测定酶活:(简称DNS法) 1、原理:纤维素经纤维素酶水解后生成还原糖,还原糖能将3,5一二硝基水杨酸中硝基还原成氨基,溶液变为橙色的氨基化合物,即:3一氨基一5二硝基水杨酸,在一定的还原糖浓度范围内,橙色的深度与还原糖的浓度成正比,据此可以推算出纤维素酶的活力。 2、采用的滤纸酶活...