质粒测序失败无信号的原因主要有几个方面。1、引物不合适,可能是引物序列与模板DNA不匹配,或者退火位点不在目标区域内。2、质粒问题,比如质粒提纯不彻底,混有RNA等杂质,影响测序反应。3、载体或片段过大,或者有特殊结构,导致测序困难。4、模板DNA质量不佳,存在降解或污染,影响测序结果。5、测序仪器或试剂问题,比如...
原因:测序模板与引物无法配对,或者配对能力较差,造成测序信号弱甚至无信号。 分析:菌液浓度太低甚至失活,或者载体为低拷贝,造成提取的质粒浓度低,测序无法产生足够信号;载体的信息错误,或者载体经过改造,测序引物与模板无法有效结合,造成测序无信号;客户提供的质粒浓度太低,质量太低造成测序无信号;引物发生降解导致测序...
如果是光秃秃的一点信号都没有:1.引物有问题2.样品中EDTA的浓度过高,抑制了酶反应.(这个问题很常见,因为elute buffer大多含有EDTA.建议换用ph8 的 Tris,EDTA free)3.除了EDTA外,elute buffer 中的其他盐离子.这个...结果一 题目 为什么会出现测序无反应信号,最好能把可能的原因列举一下, 答案 如果是光秃秃...
1。引物有问题 2。样品中EDTA的浓度过高，抑制了酶反应。（这个问题很常见，因为elute buffer大多含有EDTA。建议换用ph8 的 Tris, EDTA free）3。除了EDTA外，elute buffer 中的其他盐离子。这个一般不会完全打断反应，结果往往是测序信号突然中断，或者衰减很快。4。样本浓度太低，结果和3类似。
1.模板浓度低，2引物没有结合位点，3，测序后纯化操作失误，将产物甩出
1。引物有问题 2。样品中EDTA的浓度过高,抑制了酶反应。(这个问题很常见,因为elute buffer大多含有EDTA。建议换用ph8 的 Tris, EDTA free) 3。除了EDTA外,elute buffer 中的其他盐离子。这个一般不会完全打断反应,结果往往是测序信号突然中断,或者衰减很快。 4。样本浓度太低,结果和3类似。00...
这是做菌液PCR经常遇到的一个问题，仅使用插入序列的引物做菌液PCR，得到假阳性的结果，一测序就失败。
没有信号的原因: 1、运营商的问题,一般这个可能性比较大。这种情况打电话给客服投诉下,就会好一点。 2、手机接收信号不好,一般这个可能性很小。一般不会出现,如果手机用时间长了,就容易出现这个可能性。 ...全文 为什么对PCR产物直接测序没有测序信号 1个回答2023-02-23 14:40 原因在于测序时经历了PCR反应及...
造成这个问题的主要原因有：1、质粒提的不好，导致测序没有信号；2、使用的引物不匹配。如果是用载体引物测的，那么需核实载体与引物的匹配性，不过不排除载体上引物结合位点被破坏的可能性；如果是用扩增引物测的，那么就要排除空载体的情况。既然你肯定了不是空载体，那么就不存在这个问题。3、测序反应...