一、7-AAD染料荧光通道的原理 7-AAD与DNA形成的复合物在546nm的激发光下能够产生647nm远红外区的最大发射光。在流式细胞仪中,7-AAD的荧光信号通常被PerCP(Peridinin Chlorophyll Protein)通道接收。由于7-AAD是一种非细胞膜通透性的荧光染料,它不能通...
2.在 100 μL 流式细胞仪染色缓冲液中重悬细胞。3.要调整 7-AAD 的流式细胞仪设置，请将 5-10 μL 的 7-AAD 染色溶液添加到未染色细胞的控制管中。轻轻混合并在 4 °C 避光孵育 30 分钟。4.使用 FACScan™ 仪器测定 7-AAD 荧光（使用 FL-2 或 FL-3 通道）。注意：如果仅使用 7-AAD 染色，则...
7-AAD,中文名称7-氨基-放线菌素D,具有高DNA结合能力,但不能进入完整的细胞,所以,在流式细胞术中可用于死细胞鉴别和破膜后进行DNA倍体分析。激发波长488nm,发射波长650nm左右。 Caspase-7 Caspase-7,凋亡相关的半胱氨酸肽酶,也称为CASP7,是由CASP7基因...
1. 用0.5ml 1×PBS重悬细胞。 2. 加入PI或DAPI或7-AAD,终浓度分别为PI(5 µg/ml)、DAPI(500-1000 ng/ml)、7-AAD(2.5 µM) 3. 加入上述染料后,尽快上机,一般不要超过5分钟(有些厂家说明书写着10分钟,可能与浓度有关,可按照说明...
aad细胞流式染色法检测变染料 7-Amino-actinomycinD(7-AAD),7-氨基放线菌素D,是一种核酸染料,在流式细胞术中用于鉴定死细胞,这种作用与PI相似。但它较PI有一定优点,就是PI检测时同时占据FL-2和FL-3两个通道,如果要进行比较复杂的多色分析时不太方便,而7-AAD只占FL-3通道,这样在像FACSCalibur这样的仪器上...
你写错了，应该是7 AAD，该染料的最大激发波长是546nm, 所以最好用黄绿激光，不过常见的蓝色激光也可以，效率要低一些。最大释放波长是647nm。如果你的机器不能更换滤镜，可以使用PE-Cy5这个通道，效率最高
准备细胞悬液，每管100 μL，最多1x106个细胞，清洗并离心后用染色缓冲液重悬。如果需要，可先进行抗体标记，但7-AAD仅用于细胞表面抗原染色，内部标记不适用。添加5-10 μL 7-AAD到染色管，4°C避光孵育30分钟，调整荧光检测参数。在FACScan™仪器上测量7-AAD荧光（FL-2或FL-3通道），...
因此可以利用一些染料对死细胞和活细胞进行区分,排除死细胞的干扰。仅做表染,不需要固定破膜的实验,可以使用膜不通透性的核酸染料进行染色,死细胞会被染成强阳性,活细胞为阴性(eg. PI、7-AAD、DAPI);如需要固定破膜的实验则可以利用氨基性的死活染料染色加以区分(eg. BD-FVS系列染料)。
PI/7-AAD碘化丙啶(propidium iodide,PI)和7-AAD(7-amino-actinomycin D)的最大发射波长分别为617nm和647nm,常用于细胞凋亡检测。在大部分流式细胞仪上,PI在FL2或FL3通道检测,7-AAD在FL3通道检测。7-AAD同PI有着相似的荧光特性,但其发射光谱较PI窄,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是PI的最佳...
7-AAD是一种核酸染料,可进入死细胞内与DNA结合,能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色。7-ADD与PI有着相似的荧光特性,但其发射波谱较PI窄,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是PI的最佳替代品,因此通常将Annexin V-PE与ADD配合染色,以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。试剂盒组成: 组份 50...