阴性对照:指一般按照当前的实验方案一定不会得到正面结果的对照实验,和阳性实验组相对。 在流式实验中,由于存在光信号叠加,因此在分析流式结果时我们需要比较荧光信号与细胞的非特异性荧光。如果得到的荧光信号大于非特异性荧光,说明得到的荧光信号部分来源于荧光素的特异性荧光,就可以得出细胞表达相应的抗原分子的结论。所以,确定与荧光素无关
阴性对照的目的是确定与荧光素无关的细胞自身的非特异性荧光的强弱。通过比较待测细胞与阴性对照的荧光信号，我们可以更准确地判断细胞是否表达了特定的抗原分子。在流式检测中，我们通常会设置多类阴性对照，例如未标记抗体、同型对照抗体以及同型非特异性免疫球蛋白等。这些阴性对照的荧光信号为我们提供了细胞非特异性...
另，空白对照通常不适用于界定染色样品上的阳性门位置，因为它既不能代表其他荧光通道的泄露或外源刺激导致的本底总阴性群信号的增强，也不能排除感兴趣通道中抗体非特异性结合的实际情况。2 单染/单阳对照：即只染多色方案中其中一种荧光染色的对照管，单染对照管的数量等于多色方案设计中选择的荧光数量。当进行多...
流式细胞仪检测的是相对值，因此需要使用各种对照来设定机器参数和阈值。例如，空白对照是指未经荧光抗体染色的样本。这些样本上机检测后也会产生信号，通过调整PMT（检测器）的电压，可以将信号设定到最低水平。通常，对数比例的信号轴应将信号置于10的3次方以下的位置。阴性对照则是已知不含能被抗体识别的...
今天,我们来说说做流式检测,除了实验组对照外,还有些对照是必不可少的。 1. 阴性对照:空白对照能否代替同型对照? 阴性对照通常来说就是我们说的背景信号,很多人认为可以用空白对照当作背景信号,其实不然。 流式细胞样品的荧光=细胞自发荧光+非特异...
在流式调电压（MIG/MAG焊接）中，阴极枪接地，电源端调整电压和电流，电弧在工件和极芯之间形成，从而进行焊接。如果阴性对照不在10的0次方，可能是以下原因导致的：1. 阴性对照电流表或电路故障：阴性对照电流表或电路故障可能导致测量值不准确。需要检查电流表和电路，确保其正常工作。2. 焊接电源电压...
流式细胞仪检测的是相对值，所以必须要有各种对照来设定机器的参数和阈值。这个清单比较长。就你说的这三种，我可以展开说一下。一般用荧光标记的抗体染色后，样本有可能会出现两个细胞群，一个阳性，一个阴性的，这样的很好判断。另外一种情况，就是整个细胞群的信号在染色后发生了漂移，但是看不出阳性...
1)同型对照:使用同型抗体做平行实验,主要目的是消除抗体与样本的非特异性结合。 2)阴性细胞对照:使用已知的不表达目标抗原的细胞做平行实验,主要目的是消除抗体的非特异性结合。 3)二抗对照:第二抗体多为荧光标记的多抗,非特异性结合一般较高,可能造成基础荧光值偏高,设立二抗对照平行实验的主要目的是消除二抗的非...
第三类阴性对照使用与抗特定抗原抗体同种属、同类、同荧光标记的非特异性抗体，得到的荧光信号用于排除荧光素影响。阳性对照实验通常能获得预期结果，用于比较实验组的效果。在流式实验中，阳性对照常用于检测特定荧光素偶联抗体的效能。设置阳性对照的情况包括使用新抗体、不同批号或不同公司提供的抗体，以及...
- 仪器设置:流式细胞仪选用 FITC通道(Ex 488 nm, Em 525 nm)。- 参数调整:- 前向散射(FSC)和侧向散射(SSC)圈选活细胞群体。- 设置阈值排除碎片和死细胞。- 调整电压使阴性对照荧光信号位于 10^1-10^3区间。- 数据采集:每样本采集 10^4 个细胞,记录荧光强度。[五R] 数据分析- 使用FlowJo或同类软件...