流式细胞分析试剂和仪器的进步,使得研究人员能够开展日益复杂的多色实验多色流式细胞术,其中最大的一项挑战就是选择合适的荧光染料和抗体组合,最大限度减少对补偿和重叠调整的需求,同时保证数据质量和准确度不受影响。首先了解多色方案的基本原理之后,使用Invitrogen™ eBioscience™ 流式配色工具可以...
赛默飞Panel Builder流式配色工具,是流式小白和大神都在用的多色流式抗体配色工具。它可以与您一起轻松五步完成流式配色,加速流式实验进程。此外,我们的专业团队提供全方位的技术支持和服务,确保您的实验顺利进行。点击开始使用流式配色工具,体验赛默飞的专业服务!
在使用荧光染料时,应尽量避免使用复合染料,因为它们可能存在降解和断裂的风险,从而影响实验结果的稳定性。此外,还需考虑某些细胞类型的自发荧光特性,选择合适的激发和发射波长范围,以避免对荧光染料检测的干扰。综上所述,流式抗体配色是一个需要综合考虑多个因素的复杂过程。通过遵循标准化操作、实施质量控制并注意...
因此,对于FITC这种荧光素,流式细胞仪会选用488nm的激光器进行激发,并通过带通滤光片525/40的通道进行接收。进行多色配色方案设计时,选择荧光素的建议如下:了解流式细胞仪的激光器配置:首先,需要明确所使用的流式细胞仪配备了哪些激光器,以及每个激光器对应的接收通道类型(特别是带通滤光片)。考虑抗体的表...
流式配色基本原则第一条是「强弱搭配」,我们需要通过表达量的强弱,来搭配荧光素的弱强。 通常,根据待测细胞类型中,相应抗原的表达量,可以粗略地将抗原分子分为三类: 1. 很容易鉴定、容易区分阴阳性细胞群、阴阳性峰明显分开的抗原。例如:CD3,CD4,CD19 等。 2. 很容易鉴定、较高水平表达、经常连续性表达。例如...
流式配色原则(一)——强弱搭配,即弱表达抗原搭配强荧光染料,强表达抗原搭配弱荧光染料。搭配时要注意,抗原密度一定是在细胞亚群水平上确定的,抗原密度也会由于激活状态而有所改变。Marker的表达量可以参考相关资料或者文献来确定,荧光染料的强弱可以参考下表,或者通过染色指数判断。 图1. 荧光素种类 流式配色原则(二...
流式细胞术是通过用荧光信号去区分不同蛋白表达的,那么我们在进行荧光配色时,就需要考虑,在处理样本或做一些外源刺激时,是否会引入一些荧光信号。比如做质粒转染、病毒感染、药物处理等,都是会引入一些荧光信号的。这些荧光信号就会在流式检测中存在一定干扰...
在流式配色时,我们还需要注意以下几点:首先,要充分利用仪器提供的所有可用通道,以确保能够同时检测多个目标。其次,设置合适的对照样本,以帮助我们准确解读实验结果。另外,当需要固定破膜时,应优先选择非串联染料,以减少对其他通道的干扰。最后,选择具有窄荧光光谱的染料,以确保检测的特异性和准确性。遵循这些...
多色流式细胞术配色确实非常有挑战性, 师兄刚好有一份从 0 到 1 玩转多色配色的五步法指南,借给你看看,应该能解决你的问题! 请输入文字 多色流式细胞术真的好用又好看,不仅能够使用多个标记物进行单细胞研究,分析多个细胞群之间的关联性...
第一部分:流式配色的介绍 流式配色源于自然界中的颜色过渡和流动。 比如晚霞中的色彩过渡,或者春天到夏天的颜色变化。 在设计中,流式配色通过颜色的过渡和变化,创造出动态和生动的视觉效果。 第二部分:流式配色方案 1.晚霞方案 这个方案的颜色从深蓝色过渡到紫色,再到粉红色,最后到橙色和黄色,模仿晚霞中的色彩过...