表达相互排斥的抗原指的是两种抗原不会同时表达在一种细胞上,这两种抗原表达在两种细胞上(例如CD4和CD8),因此流式图上分群很明显,即使荧光染料之间干扰很大,也很容易通过补偿的调节避免干扰;而共表达的抗原指的是这两种抗原表达在同一种细胞上(例如CD4和CD25),在流式图上我们是要分析双阳性的细胞比例,因...
例如,常用的荧光染料FITC,其最大吸收光谱约为490nm,而最大发射光谱则位于520nm左右。因此,对于FITC这种荧光素,流式细胞仪会选用488nm的激光器进行激发,并通过带通滤光片525/40的通道进行接收。进行多色配色方案设计时,选择荧光素的建议如下:了解流式细胞仪的激光器配置:首先,需要明确所使用的流式细胞仪配...
常用荧光染料根据标记目标可分为蛋白质标记染料、核酸染料及细胞功能染料三大类,每类染料依据激发波长、发射波长及亮度差异进一步细分。实验室需根据激光器配置、检测器通道及多色搭配原则进行合理选择,确保各荧光信号在流式细胞仪上实现最小光谱重叠与最大分辨率。 蛋白质标记染料中,异硫氰酸荧光素(FITC)作为经典绿色...
NovaFluor 荧光染料具有独特的光谱特征,与其他传统荧光染料的光谱差异更大。除了可以替换传统荧光染料减少补偿带来的离散误差,也可以在全光谱流式仪上和传统荧光染料共同使用,扩大已有panel,增加可以同时检测的指标。如图7所示,仪器为5激光全光谱流式细胞仪,利用传统荧光染...
PE-Cy7是PE染料与Cyanine 7(Cy7)结合形成的荧光染料。它适用于多参数流式细胞分析,可用于检测细胞表面的抗原、细胞内的蛋白质、细胞因子等。 总之,这些荧光染料在流式细胞术中具有广泛的应用,可用于检测细胞表面的抗原、细胞内的蛋白质、细胞因子等,以及进行多参数流式细胞分析。在选择荧光染料时,需要...
荧光染料的种类 经过多年发展,目前市面上已有许多不同种类的流式荧光染料,例如单体染料、串联染料以及荧光蛋白等,并且可用的荧光染料种类仍在不断增加。 传统染料如FITC、PE、APC等单体染料已被使用多年,而新型单体染料也在逐步上市,如Bio-Rad StarBright系列染料等,其具有比传统染料更高的光稳定性和更亮的荧光。
在流式细胞术或荧光标记实验中,FITC(异硫氰酸荧光素)、PE(藻红蛋白)和APC(别藻青蛋白)是三个常用的荧光通道。每个通道都有其特定的激发和发射波长,因此在选择染料进行配色时,需要确保所选染料的光谱特性与通道相匹配,并尽量减少荧光溢出和补偿问题。FITC通道 推荐染料:FITC本身就是一种常用的绿色荧光染...
一、选择流式细胞仪能检测的染料 当流式细胞染色确定好指标之后,需要给每个指标对应的抗体配上相应的荧光染料,我们需要选择流式细胞仪能检测的染料,这就要求我们了解流式细胞仪以下信息: 1、仪器有几个激发器(激光管); 2、每个激发器对应有哪些检测通道。 下表列出了流式细胞仪的激发器和每个激发器对应能检测...
流式细胞检测就是利用流式细胞仪将液流中标记上荧光染料的单细胞或者其他微生物粒进行高速精准定量分析以及分选的生物学性质检测手段。 简单讲:将不同细胞标记上不同荧光染料,带有荧光标记的细胞排成长长的队,等待流式细胞仪的检阅,随后各个细胞经过激光发出五彩荧光,从而...
以下是几种常见的流式细胞术中应用的荧光染料的介绍。 1. FITC(Fluorescein Isothiocyanate):FITC是最常用的荧光染料之一,通过与免疫球蛋白G(IgG)结合,可用于免疫细胞表面分子的检测。FITC在波长为488 nm的激光下激发,发射的荧光信号在525 nm左右。它可以与其他荧光染料(如PE或APC)结合使用,以实现多参数流式细胞...