流式细胞术实验步骤 以肿瘤细胞为例: 1.将正常生长的对照或处理组肿瘤细胞计数,每组取 2×105-3×105 个细胞铺板,待细胞贴壁后,将正常培养基替换为无血清 1640 培养基,同步化 20 h,使得所有细胞都进入相同的细胞周期时期;同步完后,将培养基重新替换为正常含血清培养基,继...
流式细胞的具体实验步骤基本是细胞表面标记的检测和细胞内细胞因子的检测两部分。一、细胞表面标记的检测 1.试剂平衡至室温。准备:消毒台面;穿戴工作服,帽子,口罩和手套,放置棉签,草纸和有盖垃圾桶(内装有消毒剂);2.写编号纸并编号;3.每管加相应的抗体10l/每种和50l全血,震荡,室温避光20分钟。加血前摇匀血样;...
流式细胞术实验步骤是什么 流式细胞术实验: 1、制备细胞悬液,计数 2、分装,按照每个EP(1.5ml)管1-2*10 6个细胞分装,3500rpm,4度离心。 3、用100ulPBS重悬,加入10ul大鼠血清封闭,4度避光30min。 4、加入相应的荧光标记的抗体,混匀,避光,4度孵育30min。 5、加入1mlPBS洗两遍。 6、用200ul PBS重悬,...
方法/步骤 1 流式细胞术实验步骤？ 一、流式细胞术检测细胞胞膜分子1. 细胞重悬：细胞处理计数后，用细胞洗液（含2% BSA的PBS）重悬细胞，使细胞浓度为1×107/mL；2. 对照设置：空白对照、同型对照、待测样本每管取100uL上述重悬的细胞，使每管细胞数达到1×106/管；3. 一抗孵育：空白对照管不加...
看不懂以上对照的含义也没关系,我们以一个具体的凋亡实验来看看如何设置对照组: 👉 点此查看对照组设置具体案例! 第二步细胞悬液样本制备 流式细胞术的分析检测建立在单个细胞的基础上,所以制备合格的单个分散的细胞悬液是非常关键的一环。 对不同来源和不同...
尽管流式细胞术没有神奇的诀窍(岀自HowardShapiro的流式细胞术第零定律),样品制备是可以通过以下步骤来优化: 1.获得并保持单细胞悬液。 1)过滤器是从样品中去除团块的好工具。建议从40μm过滤器开始。 2)某些染色液添加剂可减少细胞成团。 a.EDTA(~1-5mM)可减少阳离子依赖性细胞粘附。
流式细胞术活细胞实验步骤在您的实验中加入荧光细胞染料包括活性染料dna染料等时请参考所添加的染料产品页了解建议的实验步骤 流式细胞术活细胞实验步骤 A. 溶液与试剂 注:利用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。 01 1X 磷酸盐缓冲盐水(PBS):配制 1 L 的 1X PBS:添加 100 ml 10X PBS至 900 ...
实验步骤 1.按照实验要求进行细胞铺板,待细胞长到需要的密度收细胞。 2.收细胞步骤和普通处理细胞相同,需要注意的是在做细胞周期时,需要将原培养基收集到离心管内,消化时间到后加入原培养基中止消化,最后一起离心。 3.离心完后去掉上清,加入1ml冰浴的PBS缓冲液重悬,并转移到1.5ml Ep管内,低温离心机4℃、1000g...
◆ 常规单细胞流式检测步骤 ⇩滑动查看全部 1. 制备单细胞悬液:贴壁细胞可用胰酶消化成单细胞后收集于离心管中,悬浮细胞可直接收集,离心 (2000 r,5 min) 去除残留培养基,1xPBS离心洗涤1-2次后,1xPBS 重悬沉淀制成单细胞悬液。 2. 离心沉淀细胞并去除上清液,按每 1x106个细胞大约 100 μl 固定剂的密...