流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。操作步骤包括细胞表面标记的检测和细胞内细胞因子的检测。 流式细胞技术是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合...
流式细胞术检测的对象一般是细胞,并且是呈独立状态的悬浮于液体中的细胞,如果要检测组织中的细胞,必须先将组织制备成单细胞悬液。 六 流式细胞术实验步骤 以肿瘤细胞为例: 1.将正常生长的对照或处理组肿瘤细胞计数,每组取 2×105-3×105 个细胞铺板,待细胞贴壁后,将正常...
1. 制备单细胞悬液:贴壁细胞可用胰酶消化成单细胞后收集于离心管中,悬浮细胞可直接收集,离心 (2000 r,5 min) 去除残留培养基,1xPBS离心洗涤1-2次后,1xPBS 重悬沉淀制成单细胞悬液。 2. 离心沉淀细胞并去除上清液,按每 1x106个细胞大约 100 μl 固定剂的密度重悬细胞,室温下 (20-25℃) 固定约 20 mi...
1.2流式细胞术原理 利用流式细胞术快速精确的对单个细胞的理化性质进行定量分析和分选,主要通过几个步骤:制备单细胞悬液,用特异性荧光染料标记的抗体进行染色,经染色后的待测细胞在一定气体压力下被压入流动室,在鞘液的包裹下细胞呈单行排列,依次通过检测区域,在激光束的照射下细胞...
原理——分选设门就是在流式图上圈出所要分选的目标细胞的过程,分选型流式细胞仪根据流式图上的设门的信息在分选过程中判断细胞是目标细胞还是非目标细胞。 正确设门的前提——首先需要真正的理解流式图,我们分析流式图时应该用“群体性”的概念去理解流式图所代表的细胞,应该将散点图上的细胞分为若干群体,分...
流式细胞术技术原理 细胞群体分散后对待测的某种成分进⾏特异的荧光染⾊，然后使悬液中的细胞⼀个个快速通过 流式细胞仪（每秒可达⼏万个细胞）。当含有单个细胞的液滴通过激光束时，带有不同荧光的 细胞所在的液滴被充上正电荷、负电荷，或不被充电，同时检测器可测出并记录每个细胞中的 待测成分的含量...
流式细胞术的原理及应用 临床实验诊断教研室 施琼 1 流式细胞术的概念 流式细胞术(Flow Cytometry, FC/MFACS)是 一种可以快速、准确、客观,并且同时检测单个 微粒(通常是细胞)的多项特性的技术,同时可 以对特定群体加以分选 研究对象为生物颗粒,如各种细胞、染色体、 微生物、及人工合成微球等 研究...
流式细胞术的基本原理是基于对粒子散射的光的测量,以及当这些粒子在流中通过激光束时观察到的荧光。 光散射 当粒子偏转入射激光时会产生光散射。这种情况发生的程度取决于粒子的物理特性,即其大小和内部复杂性。 前向散射光 (FSC) 与细胞表面积或细胞大小成正比。它是对大部分衍射光的测量,并检测刚刚偏离入射激光...