●在做流式配色之前,首先查阅文献中靶标在细胞上的表达强弱。 ●在配色时优先选择可以胞内染色的死活染料,以及优先考虑不受固定破膜影响的串联染料。 ●根据不同的靶标检测,选择不同的固定破膜液和实验条件。 ●根据不同的细胞类型和胞内细胞因子...
流式 一、溶液与试剂 注:利用反渗透去离子水(RODI)或同等级别的水制备溶液。 1X磷酸盐缓冲盐水(PBS):配制1 L的1X PBS:添加100 ml 10X PBS(#12528)至900 ml水,然后将其混合。 4%甲醛,无甲醇(#47746) 细胞通透缓冲液:购买即用型(#39487)或者通过添加30µl Triton™X-100至10 ml抗体稀释缓冲液来...
1. 流式实验中,哪些情况下需要对细胞进行固定处理? 1.1检测细胞内指标 我们在流式胞内实验时,比如检测细胞因子(如 IFN-γ)或者核内转录因子(如 Foxp3)的时候,在样本染完表面指标后,一般需要先进行固定(或者固定破膜一起),然后再进行破膜(打孔)以及后续...
流式破膜液是流式细胞术中必不可少的试剂,其主要作用是破坏细胞膜,使细胞内的成分释放出来,以便进行后续的染色和分析。本文将介绍流式破膜液的主要成分、使用注意事项以及正确使用流式破膜液的重要性。
eBioscience; 流式破膜缓冲液 (10X) 是赛默飞的一款产品,可用于固定和渗透细胞,以进行细胞因子和其他胞浆和/或核抗原的细胞内染色。此产品具有高效、稳定的特性,是科研实验的理想选择。欢迎访问赛默飞中国官网了解更多产品信息和服务详情。
问:罗工,流式细胞术里都有哪些情况要做固定破膜呀? 答:首先固定和破膜是2个步骤哦,我们来看看都有哪些情况吧。 关于固定,涉及胞内染色的步骤都需要先固定,不然我们的细胞就像气球被扎,破裂了。那只做表面染色还需要固定吗?也是会有的,比方我们去平台上机,约不到仪器或需要等待上机时间;另外,像这次的新冠样本...
固定剂、破膜剂用于细胞内细胞因子染色前对细胞膜的处理。固定剂起稳定细胞膜、保持细胞膜表面抗体与抗原结合的作用;破膜剂使流动的、完整的细胞膜产生小孔以利于抗体进入细胞。用流式细胞仪检测细胞内抗原及DNA时,对待测细胞进行固定、破膜处理后,加入相应抗体或检测试剂,孵育一定时间即可上机分析 ...
在细胞标记完荧光素抗体之后,在激光照射下,会根据荧光素的不同,发出不同波长的光(这张图是静态的),这是流式检测到特异性信号的基础原理: 如果涉及到胞内标记,我们需要先用多聚甲醛对细胞进行固定,然后再进行破膜,使膜表面形成一个较大的孔洞,方便抗体进入到细胞内,结合到细胞内部的靶位点(由于微信公众平台不能...
1. 细胞破膜酶: 细胞破膜酶是流式细胞破膜液中的关键成分之一,它能够有效地破坏细胞膜,使细胞内的成分释放出来。常用的细胞破膜酶有胰蛋白酶、胰蛋白酶-胰蛋白酶抑制剂复合物和胰酶等。 2. 蛋白酶抑制剂: 蛋白酶抑制剂是流式细胞破膜液中的另一个重要成分,它能够抑制细胞破膜酶的活性,防止细胞内的蛋白质...
eBioscience; 流式破膜缓冲液 (10X) 是赛默飞的一款产品,可用于固定和渗透细胞,以进行细胞因子和其他胞浆和/或核抗原的细胞内染色。此产品具有高效、稳定的特性,是科研实验的理想选择。欢迎访问赛默飞中国官网了解更多产品信息和服务详情。