除了细胞凋亡和细胞周期实验,活性氧(reactive oxygen species,ROS)的检测也是流式细胞分析最常见的应用之一。 ROS是指一类机体代谢产生且具有高度活性的含氧化合物。ROS是机体代谢的正常副产物,ROS含量的平衡维持了细胞的正常生理功能。ROS的失衡则会引起氧化应激反应和细胞损伤。研究表明ROS低浓度时在信号转导及免疫调控...
Dihydroethidium (二氢乙锭,DHE)是一种超氧化物阴离子荧光探针,DHE可自由透过活细胞膜进入细胞内,并被细胞内的ROS氧化,形成氧化乙啶;氧化乙啶可掺入染色体DNA中,产生明亮的红色荧光(Ex/Em=518/616 nm),使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测荧光,从而测定细胞内活性氧水平。根据活细胞中红...
接下来介绍如何对活性氧(ROS)的流式-单染数据分析。 1、导入流式数据(以fcs格式为例): 将要导入的文件(一个或多个)拖入All Samples中。 图1 2、设置横纵坐标: 根据以下箭头所示位置,将横轴设置为FSC-A::FSC-A,纵轴设为SSC-A::SSC-A。 图2 3、调整细胞群: 分别调整以下箭头所示位置,将绝大部分目的细...
流式ROS样80 实验结果展示: ROS结果图 实验流程: 收集细胞-PBS洗涤细胞-细胞计数-装载探针-孵育探针-上机检测 送样运输要求: 需要活细胞(只接武汉本地样本,外地样本不接)。 细胞汇合度高于70%(6 孔板),多提供2 个空白孔,做阴性和阳性对照。 如果细胞带绿光,不能检测。
活性氧(ROS)的流式检测通常是通过使用荧光探针如DCFH-DA来监测细胞内活性氧水平的变化。以下是该检测方法的一些关键步骤和原理: 01选择荧光探针常用的荧光染料是DCFH-DA,它能够进入细胞并在细胞内被酯酶水解成DCFH。DCFH随后可以被细胞内的活性氧氧化,生成发荧光的DCF。
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流式ROS检测 流式ROS检测 服务介绍 活性氧簇ROS是由氧分子还原所形成的分子或者离子,大部分都是由线粒体产生的副产物,它们会在细胞代谢包括细胞内呼吸和底物氧化过程中产生。适量的ROS是细胞必需的,因为ROS参与维持细胞存活及生理功能所需的各种生活过程,如信号转导和基因表达,但过量或过少的ROS都会诱导氧化应激,...
Jurkat细胞在培养基中用姜黄素37°C,预处理4小时,然后通过离心沉淀。将细胞重悬于生长培养基或所需的缓冲液中,并如上所述进行总ROS,O2-,NO或ONOO-测定。 结果 流式细胞术检测总ROS TBHP处理后Jurkat细胞中总ROS生成的流式细胞仪分析 荧光强度的变化对应...
通过选择不同的 ROS 检测探针,可以检测总细胞 ROS 或线粒体特异性 ROS。这些技术使研究人员能够在数小时(使用荧光分光光度计读板器)或数天内(使用流式细胞仪)监测基础 ROS 水平以及动态 ROS 产生。除了检测长期治疗期间动态 ROS 产生外,这些流式细胞术方法还可以通过与细胞表面标记物共染色来测量大多数特定类型...