在进行JC-1线粒体膜电位流式分析时,一般的步骤如下:1.染色:将细胞用JC-1染色,允许染料进入细胞内并与线粒体结合。2.洗涤:洗涤细胞,以去除多余的染料。3.流式细胞仪分析:使用流式细胞仪对染色后的细胞进行分析。通过设置适当的激光和检测器,可以同时获得JC-1的红色和绿色荧光信号。4.数据分析:通过流式细胞仪的软件或其他分析工具
1. 荧光信号交叉干扰:由于绿色和红色荧光信号相近,可能存在交叉干扰。为减少这种干扰,需优化流式设置和补偿参数。 2. 细胞碎片干扰:细胞碎片可能发出与JC-1相似的荧光信号,干扰实验结果。因此,在收集和洗涤细胞时需注意去除碎片,并在流式分析中设置适当的门控以排除碎片信号。 本文详细解析了使用JC-1流式检测细胞线...
Q:贴壁细胞能否直接用JC-1在6孔板染色后,再用胰酶消化下来上流式? A:不建议,贴壁细胞之间相互接触可能会导致细胞与染料接触不均一,对JC-1染料进入细胞造成影响,尤其是当细胞生长较为密集的时候。推荐消化细胞后再孵育JC-1。 Q:石蜡切片和冰冻切片可以做JC-1吗? A:不可以,JC-1实验的样本必须是活细胞。 Q:J...
结果分析: 检测JC-1单体时可以把激发光设置为490nm,发射光设置为530nm;检测JC-1聚合物时,可以把激发光设置为525nm,发射光设置为590nm。 用流式细胞仪检测细胞凋亡的情况,绿色荧光通过FL-1通道检测,红色荧光通过FL-2通道检测。FL-1+,FL-2+为正常细胞,FL-1+,FL-2-为凋亡细胞。 JC-1染色结果 注意事项: ...
1、首先写JC-1的流式检测的方法。2、其次写JC-1有单体和多聚体两种存在状态。3、最后写JC-1的反应结果。
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