五、散射门散射门控（Scatter Gates）涉及到的是流式仪激光照射细胞时收集到的前向散射光（FSC)和侧向散射光(SSC)，分别反应了细胞的大小和颗粒度。通常情况是作为分析的初始门，通过这两个参数能区分一些白细胞，如淋巴细胞、单核细胞、粒细胞，三者大小和颗粒度都有明显的区别，因此可以直接画门分析，尤其是在外...
流式细胞分析是一项实验室细胞分析技术,可根据细胞物理和荧光特性,鉴定和/或分选异质悬浮细胞群。是一种单细胞分析方法,非常适合同时获取大量细胞的单细胞水平定量信息,包括给定类型细胞数目和细胞内特定蛋白含量。 流式细胞分析的部分优势包括快速、可在研究异质细胞群时区分不同细胞亚群的差异,同时支持分析异质性细胞群...
几何平均数是指n个观察值连乘积的n次方根,在流式数据分析中常应用于对数正态分布中。几何平均数受极端值的影响较算术平均数(平均值)小。 代表流式实验为一些普遍蛋白表达类的结果,例如一些在细胞上全部表达的蛋白指标,当然这种情况相对少一些。 添加MFI操作方法 目标荧光通道的上一个门,鼠标右键选择add statistic ...
在前面的图解系列中,我们学习了流式圈出准确的单个活细胞的方法以用于进一步的分析或分选。今天,我们就来学习如何进一步分析单个活细胞的流式数据。知识储备 首先我们要有以下两个知识储备: 1.流式通道主要可以分为散射光通道和荧光通道,其展示形式总结如下表。
DUMP通道——对于流式细胞术的某些组合,可能需要将多个类型的细胞排除在后续分析之外。这种情况下可使用dump通道。通常利用相同染料标记多个不同细胞的标志物,通过对阴性群体设门,区分那些标志物呈阳性的细胞类型,并排除在分析之外(图8); 图8.利用谱系标志物的dump通道来识别人血液样本中的树突细胞。血液树突细胞是人...
流式细胞术分析的核心在于“圈门”,所谓“门”和“区域”,是指基于特定特征对细胞群体进行划分,常通过FSC(前向散射)、SSC(侧向散射)及表面标记物来进行“圈门”,以分辨和量化不同的细胞群。本文将将深入探讨流式细胞术中常见的分析图及其解读技巧,特别是如何通过几个简单步骤识别不同荧光标记抗体染色的细胞群。
第一部分 临床流式细胞分析技术概述 一、流式细胞分析技术基本原理 流式细胞仪(flow cytometer,FCM)是一种用于检测液体中悬浮颗粒特定理化特性如大小、结构、蛋白等分子种类及含量的仪器,通常包含有液流、光学、电子、软件等几个主要模块。 流式细胞术与镜检方法...
另一方面，单样本多指标的检测有利于我们后续对实验结果进行更多的算法分析，例如现在流行的一些降维和聚类分析。例如下图，利用降维分析T-sne直接获得多细胞亚群的可视化关系：因此，我们有很多老师会选择将一些淋巴和髓系的细胞亚群marker同时标记于一个样本，期望获得不错的流式结果，那么在圈门分析时应该是先圈淋巴...
这么“高大上”的技术,当然用处也是非常大,目前,流式主要可以帮助临床医生进行白血病和淋巴瘤的免疫分型,同时也可为大家都非常关注的微小残留病(MRD)的监测,以及白血病和淋巴瘤的治疗和预后等提供重要信息。不仅如此,流式还可用于淋巴细胞亚群分析、造...
小白侃流式7:流式细胞数据分析的灵魂——“门”流式细胞数据的分析，前提就是明确需要分析的目的细胞群体。在流式细胞数据分析中，设门就是在细胞分布图中选定某一范围或某一相同性状的细胞群（或者除了选定区域以外的细胞群体），并对其进行单参数或多参数分析。根据细胞类群分布的特点，门的形状可以是任意的形状，...