泛素化IP实验结果分析指南 一、引言 泛素化是一种重要的蛋白质翻译后修饰过程,通过共价连接泛素分子到目标蛋白上,参与调控多种细胞功能,如蛋白质降解、DNA修复和信号传导等。免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)技术是研究泛素化的重要手段之一,能够特异性地富集并纯化与特定抗体结合的泛素化蛋白复合物。本文旨在提供一份...
以下是一个常见的蛋白泛素化IP的步骤: 图1.泛素化修饰研究路线 1、细胞或组织的提取: 收集细胞或组织样品,使用适当的细胞裂解缓冲液(含有蛋白酶抑制剂)将样品裂解以释放蛋白质。 2、预处理样品: 样品可以通过超声波处理或离心来破碎细胞核。添加二甲基亚砜(Dimethyl Sulfoxide,DMSO)或其他交联剂以稳定蛋白质-蛋白...
泛素化实验中,变性IP通常不是标准的步骤,因为变性条件可能会导致蛋白质间的相互作用被破坏,包括泛素与目标蛋白的结合。不过,如果特指在变性条件下进行免疫沉淀(IP)以检测泛素化,那么可能需要特殊的裂解液和处理方法。一般来说,泛素化实验中的IP步骤是在非变性或温和的条件下进行的,以保留蛋白质间的相互作用。如果您...
✅Co-ip定性实验:只看A和B有无结合 ✅Co-ip定性➕定量实验:不同处理条件下看A和B结合的强弱 ✅ip实验:这里指代泛素化 做WB每个步骤都要注意的点有很多,之前我也分享过很多关于WB的tips,在相关合集里,大家可以自行翻看。 另外,对于WB实验技术的学习,我会陆续分享更多的figure解读,想学习的宝子可以蹲一...
- 洗涤后，通过西方印迹（Western blot）检测泛素化。2.泛素免疫沉淀（Ub-IP）：- 使用抗泛素抗体进行...
泛素化IP实验步骤主要包括组织或细胞的收集、裂解、预清洁,特异性抗体的加入以及免疫沉淀,最后通过免疫印迹法(Western blotting)检测结果。 首先,要进行泛素化IP实验步骤,需要收集待检测的组织或细胞,并将其裂解,释放出蛋白质。接着,将裂解液进行预清洁,以去除非特异性的蛋白质和其他可能干扰实验的物质。然后,将特异...
研究蛋白泛素化的方法:离体泛素化实验/IP+泛素化检测/MG132处理/CHX处理 1.3万播放 【实验】农杆菌电击转化,电转操作流程,根瘤农杆菌,发根农杆菌, 5103播放 【转录组专题】有参转录组报告解读-欧易生物 2.0万播放 PerkinElmer 多功能酶标仪nivo培训视频 1379播放 实验操作:4分钟学会 超速离心法提取植物外泌体! 379...
4、免疫沉淀(IP): 将所选抗体与蛋白质A/G琼脂糖珠(Protein A/G agarose beads)或磁珠结合,形成抗体-珠复合物。再将抗体-珠复合物添加到细胞提取物中,以允许抗体与泛素化底物结合。通过旋转混合或摇床培养样品,使抗体与泛素化底物发生特异性结合。
泛素化修饰ip实验步骤服务检测周期多久呀?对样品有什么要求? 分类 品牌 免疫组化/免疫沉淀/Western blot 其它免疫学服务 店内热销 色氨酸分析服务 面议 iTRAQ/TMT标签结构以及相对定量原理详解 面议 FFPE定量蛋白质组学 面议 蛋白组学DIA服务 面议 GST pull-down蛋白相互作用分析服务 ...
泛素化是一种重要的蛋白质修饰类型,通过连接泛素蛋白和目标蛋白调控细胞中的多种生命过程。泛素连接酶(E1)、泛素转移酶(E2)和泛素连接酶(E3)等酶家族参与了泛素化修饰的过程。研究蛋白泛素化修饰的调控机制对于我们深入理解细胞生物学和疾病发生发展具有重要意义。近年来,co-ip技术作为一种重要的实验手段,在研究蛋白...