缺点:1、传统的酵母双杂交技术不能研究膜蛋白的相互作用,由此派生出的新技术研究膜蛋白的相互作用较困难;2、酵母双杂交技术研究的目的蛋白相互作用需在酵母细胞核内发生相互作用,那么新的问题产生了:如果酵母双杂交技术显示两个蛋白相互作用(也就是在酵母细胞核内,这两个蛋白确实相互作用),但是两个相互作用蛋白在原...
免疫共沉淀技术在研究蛋白质相互作用方面的优点:相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。缺点:可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质-蛋白质相互作用;两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间...
3.说出免疫共沉淀实验的原理与过程,比较酵母双杂交技术和免疫共沉淀技术在研究蛋白质相互作用方面的优缺点。
【答案】:酵母双杂交技术,真核生物的转录因子大多是由两个结构上分开、功能上独立的结构域组成的。如GAL4的N端1~147氨基酸是DNA结合域(BD),其C端768~881氨基酸是转录激活域(AD)。一般情况下,AD能与GA14效应基因启动子上游的特定DNA区段(UAS)相结合,AD则推动了转录起始。免疫共沉淀技术,将...
免疫共沉淀技术,将靶蛋白的抗体连接到固体基质上,再将可能与靶蛋白发生相互作用的待筛选蛋白加入反应...
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