建立了农杆菌介导的棉花子叶瞬时表达系统.结果表明,对萌发6天的棉花子叶注射50 μLOD600为0.5的含目的基因的农杆菌LBA4404或GV3101,共培养2-3天后,外源基因表达效率最高.利用此方法从棉花萌发到观测结果,仅需8-13天,且操作简单易行,可快速检测棉花来源的启动子活性,亚细胞定位,蛋白质互作等.该方法在棉花基因功能...
2.1 棉花子叶瞬时表达系统的建立 不同生长时期的子叶对农杆菌的侵染和外源基因的表达有重要的影响。本实验采用萌发后生长2、6、10、14 和18 天的子叶为材料, 用含pCAMBIA2301 的GV3101菌液(50 μL农杆菌, OD600=0.5)(简称含GUS基因的农杆菌)注射棉花子叶的背面叶脉部位, 共培养2天后, 取整片子叶进行GUS染色。
专利名称 棉花子叶瞬时表达外源基因的方法 申请号 2013102072654 申请日期 2013-05-29 公布/公告号 CN103276013B 公布/公告日期 2015-02-25 发明人 俞嘉宁,王蕾,何鹏,周丹丹 专利申请人 陕西师范大学 专利代理人 申忠才 专利代理机构 西安永生专利代理有限责任公司 专利类型 发明专利 主分类号 C12N15/84(2006.01)I...
建立了农杆菌介导的棉花子叶瞬时表达系统.结果表明,对萌发6天的棉花子叶注射50 μLOD600为0.5的含目的基因的农杆菌LBA4404或GV3101,共培养2-3天后,外源基因表达效率最高.利用此方法从棉花萌发到观测结果,仅需8-13天,且操作简单易行,可快速检测棉花来源...
本文选择棉花子叶作为实验材料,利用GUS表达载体及农杆菌注射的方法建立了棉花子叶瞬时表达系统;通过正交实验对转化的农杆菌菌株、注射菌液浓度、共培养天数、苗龄和注射量进行了优化。在此基础上利用棉花子叶瞬时表达系统对棉花中克隆的诱导型启动子D-7的活性进行了分析,对Ghppr1和GhpprH2的亚细胞定位进行了研究,取得的...
本实验中,我们利用棉花子叶为实验材料,建立了以eGFP为报告基因的棉花子叶瞬时表达系统。以本实验室确定的长为247 bp的D-7序列为基础,构建了具有不同干旱元件的系列棉花诱导型启动子和添加了28 bp SynJ(人工合成的1个增强子序列)的启动子,以及棉花干旱胁迫响应蛋白1基因(DREB1)启动子,利用棉花子叶瞬时表达系统...
选取棉花(Gossypium hirsutum)子叶为材料,以β-葡糖醛酸酶基因(GUS)、增强型绿色荧光蛋白基因(eGFP)为报告基因,对棉花子叶生长时间、农杆菌浓度、注射量、共培养时间等因素进行了分析,建立了农杆菌介导的棉花子叶瞬时表达系统。结果表明,对萌发6天的棉花子叶注射50μLOD600为0.5的含目的基因的农杆菌LBA4404或GV3101,...
棉花子叶瞬时表达外源基因的方法一种棉花子叶瞬时表达外源基因的方法,由棉花种植,制备转化液,注射侵染,棉花培养,GUS基因表达检测步骤组成.本发明具有方便,快捷,易于操作,染色清晰等优点,适合检测棉花来源的外援基因的表达,亚细胞定位及启动子活性.俞嘉宁王蕾何鹏