方法测量颜色强度,并使用已知计算方法和/或借助校准曲线,由测量值计算5'-核苷酸酶活性或单位时间内释放的无机磷酸的量(该数值与5'-核苷酸酶活性成正比).依照本发明,将5'-AMP,5'-CMP,5'-UMP,5'-GMP,5'-IMP和5'-TMP用作核苷酸戊糖单磷酸,并在所有这六种底物上进行测量.本发明还涉及用于进行上述方法的试剂...
3、根据权利要求1或2所述测定5′-核苷酸酶活性的方法,其特征在于:温度控制在20°C到50°C范围,反应时间控制在2-30分钟。 4、根据权利要求1或2所述测定5′-核苷酸酶活性的方法,其特征在于:被测5′-核苷酸酶样品与试剂的比例控制在1/10到1/250。 5.一种5′-核苷酸酶诊断试剂盒,由以下成分组成: 缓冲液40...
通过将样品与试剂按一定的体积比混合,使之发生酶偶联反应,再将最终反应物置于生化分析仪下,检测主波长吸光度变化的情况(速度),从而测算出5′-核苷酸酶的活性大小。采用本发明完全可以通过生化分析仪器得出所需的测定结果,并且灵敏度高、精确度好,不受内外源物质的污染,便于推广应用。 法律状态 法律状态公告日 法律...
表达水平和两类RR酶活性的异常,评价RR抑制剂活性以及羟基脲耐药机制.主要结果如下: (1)组织细胞RR酶活性试验方法建立和标准化:比较不同组织细胞蛋白提取方法,根据免疫印迹和RR酶活性检测,确定先以1%硫酸链霉素沉淀去除核酸小分子,再用40%饱和硫酸铵沉淀提取纯化组织细胞蛋白,检测酶活性,建立标准细胞RR酶活性试验方法....
方法,根据免疫印迹和RR酶活性检测,确定先以l%硫酸链霉素沉淀去除核酸小 分子,再用40%饱和硫酸铵沉淀提取纯化组织细胞蛋白,检测酶活性,建立标准 细胞RR酶活性试验方法。 (2)肿瘤组织RR酶活性和I汛亚基表达水平:三例肝癌旁正常组织和癌组 织蛋白,有两例病人癌组织中RI蝴1和RRM2的表达均有上调,RRM2B在这两 ...
铁(Ⅱ)/2-酮戊二酸依赖的双加氧酶(2-OGDs)是含铁的非血红素加氧酶超家族中最大的亚家族,广泛分布在病毒,细菌,真菌,植物,哺乳动物和人类中.2-OGDs通过激活惰性C-H键来催化多种化学反应包括羟基化,卤化,闭环,去饱和,差向异构化,扩环,环氧化反应等.2-OGDs可以催化从小分子如氨基酸,生物碱,糖类,非核糖...
综观来说,我们的偶联方法测定2-OGDs的酶活力和动力学参数是可行的。 在我们的研究中,使用的是纯化的铁和2-酮戊二酸依赖的双加氧酶来验证显色体系的有效性,但此体系可能不仅仅局限于纯化的双加氧酶,可以应用到更复杂的体系如细胞裂解液或部分纯化的酶。试验中要注意避免磷酸背景的干扰,提前透析去除或者设置有效...
以前为了诊断或一般实验目的而根据上述原理测定5’-核苷酸酶活性的所有常规方法的共同特征是只在单一底物上测量酶活性。作为底物,最常用的是腺苷-5’-单磷酸(5’-AMP),胞苷-5’-单磷酸(5’-CMP)或肌醇-5’-单磷酸或者(在血溶物中)尿苷-5’-单磷酸(5’-UMP)次之。 在我们进行的用于检测恶性过程和监测肿瘤...
优选的,所述聚合酶测定方法还包括以下步骤: c、根据第二荧光强度与参照品的量的标准曲线,将所述第一荧光强度换算成对应的参照品的量,以所述参照品的量表征待测聚合酶活性;所述参照品为由两条单链核苷酸序列完全互补配对形成的双链核酸分子,或具有茎环结构且3'端和5'端完全互补配对的单链核酸分子;所述第二荧...
1.一种5′-核苷酸酶活性测定方法,步骤如下: 1)、将样品与主要由腺苷单磷酸、单价磷酸盐、腺苷脱氨酶、核苷磷酸酶、黄嘌呤氧化酶、过氧化物酶、还原型色原体组合组成的试剂混合,使之发生如下原理的反应: 腺苷单磷酸+水 5核苷酸酶腺苷+磷酸盐 腺苷+水 腺苷脱氨酶肌苷+氨离子 肌苷+磷酸盐 核苷磷酸酶次黄嘌呤+...