实时荧光RT-PCR可用于新型冠状病毒的核酸检测,RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA聚合酶链式扩增反应相结合的技术,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测...
这其实用到了荧光定量RT-PCR技术。 (1)核酸提取 加入裂解液,洗涤,离心得到RNA。 (2)逆转录RNA→cDNA 因为单链RNA很不稳定,所以通常需要逆转录成DNA,这样会比较稳定的进行后续操作。 (3)PCR扩增 由于提取到的RNA通常量很低,所以逆转录得到的DNA也不多,而且,通常还混杂有其他的DNA,所以,我们需要把目标DNA进行...
临床上常采用RT-PCR技术,对受测者咽拭子取样后进行新型冠状病毒核酸检测。RT-PCR是指以病毒的RNA为模板合成cDNA,并对cDNA进行PCR扩增的过程。为定量测定样品中病毒的核酸,常采用实时荧光PCR扩增技术,该技术原理如题14图所示。在PCR反应体系中每加入一对引物的同时,加入一个与某条模板链互补的荧光探针,当Tag DNA...
新冠病毒核酸检测主要用荧光定量RT-PCR技术,这种技术是荧光定量PCR技术与RT-PCR技术的结合。在检测过程中,先采用RT-PCR技术将新冠病毒的核酸(RNA)逆转录为对应的脱氧核糖核酸(DNA);再采用荧光定量PCR技术,将得到的DNA进行大量复制,同时,使用特异性探针对复制得到...
核酸检测主要是通过实时荧光定量PCR检测新冠病毒保守的片段区域的序列,以确定体内是否含有该病毒。当定量PCR检测出有该序列,说明有可能感染了病毒,会通过多次PCR进行检测并结合临床检测指标进行确诊。 实时荧光定量PCR使用Taqman法进行检测,使用针对病毒2个或更多的保守区域特异性引物和探针(不同国家或地区检测的区域不一致...
实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是( ) A. 做RT-PCR之前,需要先...
新冠核酸检测(RT-PCR),一例无任何扩增曲线(右图)。样本来源为应检尽检人员,4小时内送检,单管单采。中元提取试剂,伯杰扩增试剂。本检测批次样本92个,质控4个(1个弱阳性质控品,三个生理盐水,参与从提取到扩增的全过程)。扩增图示: ...
RT-PCR技术是确诊新冠肺炎患者的核酸检测手段(如图),该技术首先将病毒COVID-19的核酸通过逆转录形成DNA,然后以此DNA链为模板进行体外DNA复制,反应体系中
目前人们所使用的新冠病毒核酸检测技术,主要是一种叫做实时荧光 RT-PCR的技术。 为了更好理解它,我们可能要先从DNA的复制讲起。 DNA复制 人体的组织由一个个细胞组成,每个细胞就是一个单元,它们各自有条不紊地进行运作,如此构成了复杂的机体。 而单就...
检测病毒的核酸的检测技术:高通量基因组测序,荧光定量RT-PCR,基于逆转录等温核酸扩增的检测技术,基于核酸的基因编辑体系的检测技术,基于核酸的微流控的检测技术;检测体内病毒抗原、抗体的检测技术:酶联免疫吸附测定(ELISA),IgG/IgM-胶体金法;辅助手段:电子计算机断层扫描(CT)。