核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶（ribulose-1，5-bisphosphale carboxylase，RuBPCase）是光合作用碳代谢中的重要的调节酶，是植物中最丰富的蛋白质，主要存在于叶绿体的可溶部分，总量约占叶绿体可溶蛋白50%~60%。本实验分别用分光光度法和同位素法测定酶的羧化能力。I.分光光度法 一、原理 在RuBPCase的催化下，1分子...
核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶活性的测定的基本原理是核酮糖-1,5-二磷酸梭化酶催化 1 分子的核酮糖-1, 5-二磷酸(RuBP) 与 1 分子的 CO2结合,产生 2 分子的 3-磷酸甘油酸 (PGA),PGA 可通过 3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用,产生甘油醛-3-磷酸,并使 NADH 氧化,其反应如下: 由上...
1.核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶活性额测定 1.1称取0.1 g新鲜叶片,放于已经预冷的研钵中。 1.2加入1 mL,4℃提取缓冲液(50 mM Tricine-NaOH pH 7.9, 0.1% PVP-40, 5 mM MgCl2)冰上研磨,(缓冲液分3次加入,第一次0.5ml,剩下两次分别0.25ml将研钵冲洗干净),将研好的样品装入1.5ml的离心管中,...
核酮糖 1,5-二磷酸羧化酶羧化活性的测定 一、实验原理 核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶是光合作用中一个关键酶,它在Calvin 循环中催化中催化 CO2 的固定,生成 2 分子的 3-磷酸甘油酸(3-PGA),同时它是一个双功能酶,又能催化将 O2 加在核桐糖-1,5-二磷酸(RuBP)上生成 1分子的磷酸乙醇酸和 1 ...
核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶（Ribulose-1，5-bisphosphate carboxylase/oxygenase，通常简写为Rubisco）是光合作用中决定碳同化速率的关键酶。Rubisco是叶绿体基质中催化CO2与RuBP，即核酮糖-1,5-二磷糖结合生成2分子3-磷酸甘油酸，进而发生一系列反应，将ATP中的化学能转化到葡萄糖中。它在光合作用中卡尔文循环里催化第...
用分光光度法测定了菠菜重组叶绿体中的核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶(RuBPCase,E.G.4.1.1.39)活性.酶可被光活化,酶活性随光强度增加而增加,在200Klux下酶活力增加2.9倍.在重组叶绿体中加入硫氧还蛋白,则光还原的硫氧还蛋白能增强酶的光活化作用.改变叶绿体层膜和可溶部分的比例以及使硫氧还蛋白与层膜预温等实验的...
1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)是光合碳同化的关键酶,是一个存在于叶绿体基质中的双功能酶,参与了植物光合作用和光呼吸过程,在调节两者之间的关系中起重要作用。1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶是光合碳同化的关键酶,在光合作用中卡尔文循环里催化第一个主要的碳固定反应,将大气中游离的二氧化碳转化为...
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品活性。 样品收集、处理及保存方法
②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定, 冻存,用于核酮糖 1,5-二磷酸羧化酶的检测。 ③细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如有必要用 Rubisco Lysis buffer 进行适 当匀浆,离心,取上清液,冻存,用于核酮糖 1,5-二磷酸羧化酶的检测。 ④高活性样品:如果样...