基于RNP与替代的转染方式(如Nucleofector电转技术)统连用的CRISPR-Cas9的基因组编辑方式,可以让研究人员优化实验以获得成功的CRISPR-Cas9基因组编辑,目前已有了显著的进展。2021年3月,美国斯坦福大学、贝勒医学院等全球知名机构的研究人员在国际顶级学术期刊Nature Medicine发表重磅研究论文,利用IDT的Alt-R® CRISPR...
德国进口Lonza 4D-Nucleofector细胞核转染系统(原Amaxa 4D-Nucleofector核转仪),创新性地结合经典电穿孔技术和细胞特异性电转染液,实现了DNA、RNA(如crRNA、tracrRNA、gRNA、sgRNA)、RNP核糖核蛋白复合体、蛋白质(如Cas9核酸酶、切口酶、dCas9蛋白、Cas12a/Cpf1核酸酶)、小分子物质高效转染各类哺乳动物贴壁细胞、悬浮细...
4D Nucleofection 细胞核转染仪是医学院科研中心生物医学基础测试分析平台主要仪器之一,其原理是利用电子脉冲在细胞膜上瞬间生成小孔,配合使用优化好的转染程序与转染试剂,不仅可将外源核酸物质导入细胞质,甚至还可让外源核酸直接通过核膜进入细胞核,转染效率最高可达...
Lonza公司提供了一套详细的核转染操作规程,以下是一般步骤: 1. 实验前准备,确认所需的培养基、转染试剂和细胞培养器材已经准备就绪。检查目标细胞的状态和数量,确保其处于良好的生长状态。 2. 转染试剂准备,根据Lonza提供的说明书,准备转染试剂。通常包括转染缓冲液、转染试剂和外源DNA。 3. 细胞处理,将目标细胞用...
下面以pcDNA3为载体,p16为目的基因,介绍真核转染的实验操作。 一、试剂准备 1、HBS(Hepes-buffered saline):876mg NaCl溶于90ml ddH2O,加入1M Hepes,调pH到7.4,补ddH2O至100ml, pH7.4,滤过除菌。 2、核酸贮存液,过滤除菌。 3、培养基:含血清或不含血清的,用于转染细胞的正常培养。
德国Lonza Nucleofector细胞核转染技术(原Amaxa Nucleofector),由核转染仪器、核转染试剂盒、根据细胞类型优化的转染方案共同构成,其根据特定细胞设计的电脉冲参数、特殊电转缓冲液,击穿细胞膜和核膜,使包括DNA、RNA、RNP复合体、蛋白质、小分子物质在内的外源物质,不但可以进入细胞质,还可直接进入细胞核,大幅提高传统电...
Lonza电转仪适配多个系统模块,明星款有Lonza 4D-Nucleofector核转染系统。可用于兔疫细胞、干细胞、神经细胞、内皮细胞等较难转染的原代细胞和各类细胞系中,其不依赖于病毒感染以及细胞有丝分裂,可加快基因表达,已成功转染1200余种细胞系、130余种原代细胞,多数细胞系转染效率可高达50-70%,部分原代细胞转染效率可...
LONZA 4D-Nucleofector细胞核转染系统,即原德国Amaxa 4D-Nucleofector核转系统,结合电穿孔技术和细胞特异性转染液,通过系统内置优化的转染程序,将外源基因高效导入目标细胞的细胞质中,并可直接入核,整合到细胞染色体中。 Nucleofector核转系统可用于免疫细胞、干细胞、神经细胞、内皮细胞等较难转染的原代细胞和各...
Nucleofector 细胞核转染技术操作步骤 整个操作过程只需四步,非常简单、高效。 第1步:处理细胞,精确计数 第2步:混合DNA、转染液,重悬细胞,加入转染杯 第3步:将转染杯放入转染仪,按键选择相应程序,按"start"键开始转染,10秒钟左右 第4步:取出细胞继续培养 ...
名称数量保存条件 VigoFect0.4 ml4℃ 操作基本流程 1.按常规方法,准备待转染的细胞。 2.取转染试剂和DNA按一定比例混合,配制转染工作液。 3.将转染工作液加入培养液中,继续细胞培养。 4.24-48小时后收取细胞鉴定,或加相应抗生素筛选稳定克隆。 使用说明书 点击下载...