1)DNA模板的制备及引物设计与合成 取适量菌体溶于Takara裂解缓冲液(代码D304)中变性后离心取上清液作为模板(模板DNA),反应条件为80 ℃,15 min。选取通用引物27F和1492R作为扩增引物,正反测序,扩增引物序列分别为27F:5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’,1492R:5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’ 2)扩增反应 使用高保真性...
现在的TAKARA TOMY(2006年3月1日与同业的TAKARA合并而成立)为其前身。另外,关于其子公司于TOMY继承的铁道模型(N scale、HO sacle)商标“TOMIX”的TOMYTEC也有纪录。该公司的主力商品有Tomica、Pla-rail、ZOIDS等等。 该公司名称“三大株”是源自于当时主要出口国也通用的创业者的姓氏“富山”而来。该公司以制造商...
2.试剂与仪器:哥伦比亚血琼脂平板购自北京健步永康贸易有限公司;布氏琼脂粉购自美国BD公司;脑心浸液肉汤(brain-heart infusion broth,BHI)购自英国Oxoid公司;无菌脱纤维羊血购自北京索莱宝科技有限公司;厌氧产气袋和艰难梭菌毒素A&B检测试剂盒购自法国...
1.1 细胞,病毒,菌株及质粒 BHK-21 细胞(ATCC CCL-10);猪源 GETV 毒 17 期 杜炳辰等:盖塔病毒 SC483 株 cDNA 感染性克隆的构建 3481 株 SC483(MN478486)由动物疫病防控全国重点实 验室分离鉴定并保存;大肠杆菌 DH5α 感受态细胞购 自 TaKaRa 公司;重组质粒 pOK12-CMV 由动物疫病 防控全国重点实验室构建...
3.将提取的BV杆粒分别转入到两个细胞株(Sf9‑JD31和Sf9)中,120 rpm,27 ℃培养4天,用TakaRa杆状病毒滴度测定试剂盒对收获的杆状病毒滴度进行定量检测。 [0067]结果:Sf9‑JD31细胞株扩增的杆状病毒滴度均值为3.01E+08 IFU/ml,Sf9细胞培养的细胞株扩增的杆状病毒滴度均值为2.13E+08 IFU/ml。
能否降低PCV2病毒血症的试验在黑龙江省某猪场进行,随机选取2～4 周龄健康仔猪若干头,以耳号标记;猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株)购买自哈尔滨维科生物技术开发公司,生产批号:2013006;TIANamp genomic DNA kit购买自天根生化科技(北京)有限公司;引物由北京华大基因科技有限公司合成; Premix Ex Taq HS kit购买自TaKaRa...
病毒RNA提取试剂盒、Mix均购自于OMEGA公司,核酸染料GoodView、DNA Marker DL2000、反转录试剂盒为TaKaRa产品,DMEM培养基、琼脂糖、50X TAE电泳缓冲液购自Invitrogen公司。 1.3 病料 灰鹦鹉腺胃与肌胃均一份,由广州某异宠动物医院提供,进行RNA抽提,反转录为cDNA,保存与﹣20℃备用。
[0087]限制性内切酶(XbaI和HindⅢ)、SppIP购于宝生物工程大连有限公司;T4 DNA ligase、 DNA Marker(DL‑2000、 λ‑HindⅢ)购于Takara生物公司; 质粒小提试剂盒和DNA凝胶回收与纯化试剂盒购于美国Omega Bio‑Tek公司; 10×M buffer、 10×T4 buffer、 D‑丙氨酸和2%Gly, 由吉林农业大学实验室配制并保存...
采用Takara公司PrimeScriptTM1st Strand cDNA Synthesis Kit试剂盒把提取到的总RNA反转成cDNA,-20℃保存备用。 合成3对引物(F表示上游引物,R表示下游引物),序列如下: RT157-1F GCCCGAGATGGAGTGTTTGAC RT157-1R ATCTAAGGATACCACCGCAATCACC RT157-2F CGGTACAGGGACGGAAGATAC ...