建议:为了快速排查原因,请尝试混合10μL底物溶液和2μL浓缩HRP酶,观察是否发生颜色变化,并及时对显色结果拍照。如果有颜色变化(混用后呈现深蓝色/蓝绿色),表明HRP酶和TMB并无污染问题,可重新取一条板条,在避免以上问题的情况下制作标曲。例3:整体偏高 酶标仪仪器光密度范围过广,导致检测OD值范围也很高。...
2、什么是校准曲线? 3、首先标曲要做几个点? 4、标曲R值是几个9才合格? 5、标准曲线的检验? (1)线性检验: 即检验校准曲线的精密度。对于以4~6个浓度单位所获得的测量信号值绘制的校准曲线,分光光度法一般要求其相关系数|r|≥0.9990,否则应找出原因并加以纠正,...
只有解决了标准曲线与样品基体的匹配问题,我们的定量才可靠。内标法和替代物的使用则是为了解决仪器和前处理的影响问题。 标准曲线的做法 按GB/T 22554-2010《基于标准样品的线性校准》推荐: 1、标准曲线的浓度范围应覆盖正常操作条件下的被测量范围; 2、标准样品的组分尽量与...
ELISA试剂盒的标曲制作是一项重要的实验步骤,它可以用来确定样品中目标蛋白的浓度。以下是一个简单的标曲制作流程: 准备一系列标准样品,浓度分别为0、0.1、1、10、100、1000 ng/mL,这些浓度可以根据实验需求进行调整。 将每个标准样品加入ELISA板的孔中,每个浓度应有至少三个重复孔位。
直线回归标曲 2.二次多项式拟合回归方程 二次多项式成抛物线状,开口向下或者向上,在很多ELISA实验中,拟合近似于二次多项式的升段或者降段,由于曲线的特性,同一个浓度值在曲线图上可能表现出没有对应的OD值、有一个OD值,或者两个OD值,所以使用二次多项式拟合时,最好保证取值的范围都落在曲线的升段或者降段,否则哪...
制作标曲是一项需要严谨和专业性的任务。以下是制作标曲的步骤:首先,确定标曲的目的。标曲可以用于标识公司、产品或服务,或者用于电视或电影的片头或片尾。其次,选择适当的音乐风格。音乐风格应该与公司、产品或服务,或者电视或电影的风格相匹配。第三,创作一个易于记忆和辨认的主题。主题应该与公司、产品或服务...
选择这两列,插入散点图,散点图,任意一个点,我们右键添加趋势线-显示公式-显示 r 的平方值,我们的标曲就绘制出来了 R 的平方要大于 0. 99,当然越大越好。我们之后利用标曲去计算蛋白浓度,就是用我们样品它的 OD 值,也就是 y 减去 0. 1911,再除以 1. 9131,得到了我们的蛋白浓度。但是我们这个...
竞争ELISA法的结果判定有两种方法,粗略判定可用第一种定性分析方法,而定量判定用第二种方法。竞争ELISA法的标曲制作和浓度计算与双抗体夹心法ELISA试剂盒明显不同,具体详细说明如下: 定性分析 用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围(ppb)。假设样本1的吸光度值为0.527,样本2的吸光度值为1.225,标准品吸...
一、标曲校准方法概述 总氮的标曲校准方法,是使用标准品进行校准,以确保检测结果的准确性和可靠性。 二、标准品的配制 标准品的配制一般采用氨态氮(NH4+-N)和硝态氮(NO3--N)的混合液。具体的配制方法可以参考相关仪器的说明书。 三、标曲校准步骤 1.使用去离子水或者超纯水清洗测量系统,避免外界杂质影响校准...