至于浸润硅胶,推荐的的流程是:先把装好硅胶的硅胶柱竖直放好,硅胶表面用手拍平,硅胶柱底部连接水泵,把硅胶抽实,然后从上面倒入极性最小的洗脱剂,到洗脱剂刚要漏下时,关闭截止阀,防止溶剂抽到水泵。然后在加压状态,用最小的展开剂冲七八个柱体积就可以把硅胶浸润地均一。3、上样 上样分为湿法上样和干...
高效液相色谱法(HPLC)常用于金属离子的测定,通过衍生化反应,金属离子与络合剂结合生成新的络合物,从而实现对多种离子的有效分离。常用的络合剂包括杂环偶氮类试剂、卟啉类试剂以及硫代氨基甲酸盐类试剂等。以二乙基二硫代氨基甲酸钠(NaDDTC)为例,它是一种高效的柱前衍生化试剂,能与多种金属离子形成稳定的络合物...
尼龙棉柱分离法是一种基于层析技术的分离方法,其原理是利用尼龙材料的吸附特性,将目标分子从混合物中分离出来。在尼龙棉柱中,目标分子与尼龙发生相互作用,如吸附、解吸等,从而实现分离。该方法适用于多种生物大分子的分离和纯化,如蛋白质、核...
加压柱通过外加压力使淋洗剂能够更快地通过柱子,特别适用于易分解样品的分离,是一种更为高效的方法。加压源可以是压缩空气、双连球或小型气泵。常压柱在相同条件下分离效率最高,但耗时较长,例如,用于天然化合物分离的常压柱,可能需要数月之久。减压柱虽然能够节省资源,但存在 溶剂挥发和操作噪音的问题。...
通过以上步骤,我们可以有效地利用柱色谱法来分离和纯化混合物中的各组分。1)对于溶解度较好的固体样品 我们首先选择极性较小的溶剂将其溶解,然后按照液体样品的处理方式进行上柱。常用的溶剂包括二氯甲烷、甲苯、正己烷和石油醚等。但需注意,所选溶剂的极性不能超过洗脱剂的极性,以避免影响层析柱的分离效果。同时...
这种方法的本质是利用不同物质在固定相和流动相之间的分配差异实现分离,听起来像是一场分子之间的“赛跑”,跑得快的先出来,跑得慢的后出来。但实际操作中可没这么简单,背后涉及材料科学、流体力学和表面化学的复杂博弈。 色谱柱的核心结构包括柱管、填料和进出口装置。填料的选择直接决定分离效果,硅胶、氧化铝、聚合...
固定相是层析柱法分离中起关键作用的物质,其性质影响分离效果。流动相在层析柱内推动样品前进,不同流动相适配不同分离需求。硅胶常作为固定相,因其具有较大比表面积和良好吸附性能。氧化铝也是常用固定相,根据活性不同适用于不同物质分离。有机溶液如甲醇、乙腈常作为高效液相层析的流动相。水相缓冲液在某些情况下可...
柱色谱法,基于混合物中各组分在固定相和流动相中的分配系数不同实现分离。固定相是柱内填充物,如硅胶,对混合物中各组分吸附或溶解能力不同。流动相是洗脱溶剂,样品组分在其与固定相间分配。分配系数小的组分在流动相中溶解度大,移动快;反之则慢。样品在柱中移动时,组分在两相间反复...
选定了合适的柱子后,下一步就是设定分离方法。这里,我们介绍一种经典的方法——线性梯度法。该方法基于薄层跑板的比例来确定初始和最终溶剂比例,并按照特定的步骤进行分离。首先,以薄层跑板的比例除以4得到初始溶剂比例,然后将其乘以2得到最终溶剂比例。接下来,按照以下步骤进行操作:首先,以初始比例走1个柱体积...
柱色谱分离法的操作步骤 柱色谱分离法操作含装柱、加样等关键环节。 其步骤旨在实现混合物中各成分有效分离。选择合适的色谱柱,依分离需求定规格。准备固定相,如硅胶、氧化铝等常用材料。固定相要进行预处理,保证性能稳定。采用干法或湿法将固定相装入色谱柱。干法装柱需轻轻敲击使固定相均匀填充。湿法装柱要注意避免...