ChIP-Seq 要求超声后的片段大小在200-600 bp 之间; ChIP-qPCR 要求超声后的片段大小在300-1000 bp 之间; 关于染色质打断的条件优化,请参考本说明书第七部分的ChIP实验成功关键要素中的“超声或酶切后DNA片段的大小质控和优化”这一章节。 Option A:超声随机打断法 收集上一步骤Step 2中的细胞裂解液或组织匀浆...
图ChIP检测结果示例图A ChIP检测DNA跑胶示例图。B ChIP检测结果分析示例图。C ChIP检测扩增曲线示例图。D ChIP检测溶解曲线示例图。
ChIP-on-chip是将染色质免疫共沉淀(ChIP)和DNA微阵列芯片技术相结合用来高通量分析DNA和蛋白质结合或者翻译后染色质/组蛋白修饰的一种方法。 该技术已经成为深入研究内源蛋白和DNA相互作用的有力工具。因该技术能在基因组范围内确定转录因子或组蛋白修饰所在位置的染色质结合位点,故也被称为全基因组定位分析 (genome...
• ChIP-Seq 要求超声后的片段大小在200-600 bp 之间; • ChIP-qPCR 要求超声后的片段大小在300-1000 bp 之间; Option A:超声随机打断法 收集上一步骤Step 2中的细胞裂解液或组织匀浆液,直接进行如下超声打断流程。 A、非接触式全自动超声波破碎仪,高功率,30秒+30秒,超声28 cycles。或接触式超声仪230W...
染色质免疫共沉淀（ChIP检测）是一种检测转录因子等蛋白与DNA之间相互作用的实验方法。该方法通过使用甲醛将DNA和蛋白交联，超声破碎染色质，沉淀蛋白，然后通过特异性抗体富集目的蛋白，最终通过定量PCR检测蛋白可能结合的DNA。实验流程主要包括细胞处理、免疫共沉淀和定量PCR检测三个部分。首先，将细胞培养至...
在活体细胞中，先对与调节蛋白结合的染色质进行分离，然后随机剪切染色质，用调节蛋白的抗体沉淀目的染色质，最后用QPCR、DNA测序的方法进行检测研究。2、 实验流程 3、 样品要求 1) 动物组织样品：>100mg (黄豆粒大小)2) 细胞样品:>2*107 3) 植物组织>5g 4、 注意事项 客户需要提供物种信息及基因信息,及IP...
染色质免疫沉淀分析(ChiP)是基于体内分析发展起来的方法,它的基本原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并通过超声或酶处理将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过抗原抗体的特异性识别反应沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用...
染色质免疫沉淀技术还可用于分析两种蛋白共同结合的DNA序列，即ChIP reChIP方法。ChIP reChIP是在第一次ChIP的基础上不解交联，而继续进行另一个目的蛋白的免疫沉淀，从而得到与两种目的蛋白都结合的DNA序列。值得注意的是，因为通过两次免疫沉淀富集的DNA量比较少，所以在分析时通常要把多次免疫沉淀的DNA浓缩后再进行...