作为一种研究蛋白质与DNA相互作用的技术,ChIP可以完整真实地反映细胞中特定蛋白与DNA的结合关系,它通过多种蛋白质组学和分子生物学方法,包括交联、细胞裂解(蛋白质-DNA提取)、核酸剪切、抗体免疫沉淀、DNA样本回收,将蛋白-DNA复合物分离出来进一步研究特定的结合蛋白或与其结合的DNA,同时结合qPCR(ChIP-qPCR)可用...
作为一种研究蛋白质与DNA相互作用的技术,ChIP可以完整真实地反映细胞中特定蛋白与DNA的结合关系,它通过多种蛋白质组学和分子生物学方法,包括交联、细胞裂解(蛋白质-DNA提取)、核酸剪切、抗体免疫沉淀、DNA样本回收,将蛋白-DNA复合物分离出来进一步研究特定的结合蛋白或与其结合的DNA,同时结合qPCR(ChIP-qPCR)可用于检测...
作为一种研究蛋白质与DNA相互作用的技术,ChIP可以完整真实地反映细胞中特定蛋白与DNA的结合关系,它通过多种蛋白质组学和分子生物学方法,包括交联、细胞裂解(蛋白质-DNA提取)、核酸剪切、抗体免疫沉淀、DNA样本回收,将蛋白-DNA复合物分离出来进一步研究特定的结合蛋白或与其结合的DNA,同时结合qPCR(ChIP-qPCR)可用于检测...
ChIP(chromatin immunoprecipitation assay, 染色质免疫共沉淀)是研究体内DNA与蛋白结合的重要技术,主要包括ChIP-qPCR和ChIP-seq两种;其中ChIP-qPCR用来验证与目标蛋白结合的已知DNA片段,ChIP-seq用来筛选与目标蛋白结合的未知DNA片段。 先用甲醛交联细胞内“蛋白-DNA”复合物,并用超声波破碎DNA至适合的长度。细胞裂解后,...
经过解交联和DNA纯化处理后,ChIP实验可以暂时告一段落。此时,可以将纯化后的DNA样品存放在-20°C环境下。接下来,我们进入定量DNA的环节,这一步骤主要依赖于qPCR技术。qPCR能够对目标DNA片段进行精确的定量分析,通过扩增特定序列并与Input、阳性对照和阴性对照的量进行对比,我们能够验证目的蛋白是否确实与预期的DNA...
作为一种研究蛋白质与DNA相互作用的技术,ChIP可以完整真实地反映细胞中特定蛋白与DNA的结合关系,它通过多种蛋白质组学和分子生物学方法,包括交联、细胞裂解(蛋白质-DNA提取)、核酸剪切、抗体免疫沉淀、DNA样本回收,将蛋白-DNA复合物分离出来进一步研究特定的结合蛋白或与其结合的DNA,同时结合qPCR(ChIP-qPCR)可用于检测...
ChIP可以完整真实地反映细胞中特定蛋白与DNA的结合关系,将蛋白-DNA复合物分离出来进一步研究特定的结合蛋白或与其结合的DNA,结合qPCR(ChIP-qPCR)可实现定量分析,结合二代测序(ChIP-seq)可对目标DNA进行测序分析等。 ChIP实验原理 ChIP的基本原理与Co-IP类似,即用DNA结合蛋白的抗体去沉淀得到蛋白-DNA复合物。简单讲,...
ChIP可以完整真实地反映细胞中特定蛋白与DNA的结合关系,将蛋白-DNA复合物分离出来进一步研究特定的结合蛋白或与其结合的DNA,结合qPCR(ChIP-qPCR)可实现定量分析,结合二代测序(ChIP-seq)可对目标DNA进行测序分析等。 ChIP实验原理 ChIP的基本原理与Co-IP类似,即用DNA结合蛋白的抗体去沉淀得到蛋白-DNA复合物。简单讲,...
ChIP可以完整真实地反映细胞中特定蛋白与DNA的结合关系,将蛋白-DNA复合物分离出来进一步研究特定的结合蛋白或与其结合的DNA,结合qPCR(ChIP-qPCR)可实现定量分析,结合二代测序(ChIP-seq)可对目标DNA进行测序分析等。 ChIP实验原理 ChIP的基本原理与Co-IP类似,即用DNA结合蛋白的抗体去沉淀得到蛋白-DNA复合物。简单讲,...
A:染色质免疫共沉淀(ChIP)所获得的DNA产物,在ChIP-Seq中通过高通量测序的方法,在全基因组范围内寻找目的蛋白(转录因子、修饰组蛋白)的DNA结合位点片段信息;ChIP-qPCR需要预设待测的目的序列,针对目的序列设计引物,以验证该序列是否同实验蛋白结合互作。