确实是这样,具有高水平表达重组蛋白的潜能是杆状病毒-昆虫细胞系统的一个主要优点。在此, 高水平的含义非常宽泛,是指每升感染杆状病毒的昆虫细胞培养物或4 g昆虫细胞(通常细胞密度为 1X106 个细胞/mL)产出大于或等于100 mg的重组蛋白。此外,在杆状病毒-昆虫细胞系统中高水平表达的蛋白质很少形成包涵体,而包涵体常常...
确实是这样,具有高水平表达重组蛋白的潜能是杆状病毒-昆虫细胞系统的一个主要优点。在此, 高水平的含义非常宽泛,是指每升感染杆状病毒的昆虫细胞培养物或4 g昆虫细胞(通常细胞密度为 1X106 个细胞/mL)产出大于或等于100 mg的重组蛋白。此外,在杆状病毒-昆虫细胞系统中高水平表达的蛋白质很少形成包涵体,而包涵体常常...
昆虫细胞杆状病毒表达系统(IC-BEVS)是一类应用广泛的真核表达系统,在高表达蛋白的同时,具有同大多数高等真核生物相似的翻译后修饰加工以及转移外源蛋白的能力。同时由于其不存在任何对哺乳动物有潜在威胁的动物病毒片段,自1983年引入BEVS技术以来,杆状病毒系统已成为用于重组蛋白表达的最通用、最强大的真核载体系统...
杆状病毒-昆虫细胞表达系统概述及策略优化 杆状病毒-昆虫细胞表达系统是利用杆状病毒作为载体,在昆虫细胞中表达外源蛋白的真核表达系统,具有表达效率高、插入外源基因容量大、对操作人员及环境无威胁等特点,同时能够对表达的外源蛋白进行翻译后修饰及加工等,使表达的蛋白具有生物学活性。本次讲座重点介绍了杆状病毒载体构建...
杆状病毒-昆虫细胞系统是一个由两个部分组成的二元系统。第一个部分就是杆状病毒表达载体,它是一个昆虫病毒,其功能显然就是将编码目标蛋白质的外源基因导人宿主细胞中。杆状病毒表达载体的另一个功能是为在晚期或极晚期启动子控制下的目标基因的转...
昆虫杆状病毒(Baculoviridae)作为表达载体的主要应用是基因工程。它们是一种昆虫病毒,具有长而细的杆状结构,因此得名。昆虫杆状病毒被广泛用于基因工程中,因为它们可以高效地感染昆虫细胞,并在昆虫细胞中复制和表达基因。以下是昆虫杆状病毒作为表达载体的主要应用: ...
昆虫杆状病毒表达载体系统是以杆状病毒作为外源基因载体,以昆虫细胞作为宿主进行基因组自我扩增与目的蛋白的表达。构建重组杆状病毒的关键在于构建穿梭转移载体:将目的基因插入到 ph 或 p10 启动子下游的多克隆位点,因转移载体中含有与野生型杆状病毒进行重组的同源序列,所以转移载体与亲本病毒 DNA 进行重组时将获得携带有...
一、昆虫细胞转染: 1.Sf9细胞计数,取6孔板中的两孔,每孔加入9×10 5个细胞(其中一孔设为正常对照),并以全培培养至少1小时,使细胞贴壁。 2.准备重组质粒和细胞转染试剂的混合物: a.溶解1μg纯化重组杆状病毒重组质粒于100μl无添加成分的Grace’s Medium。 b.转染试剂充分摇匀后取6μl加入100μl无添加成...
杆状病毒-昆虫细胞表达系统是一个由两部分组成的二元系统。第一部分是杆状病毒表达载体,它是一个昆虫病毒,其功能是将编码目标蛋白质的外源基因导人宿主细胞中。杆状病毒表达载体的另一个功能是为在晚期或极晚期启动子控制下的目标基因的转录提供所需的转录复合物。通常采用目宿银纹夜蛾杆状病毒(AcNPV)作为表达载体。
杆状病毒载体表达系统(Baculovirus expression vector system,BEVS)凭借其稳定的实验体系、高表达水平及翻译后修饰功能而被普遍认可为一种表达大规模蛋白的强有力的工具,可以提供高活性的重组蛋白,解决在其它体系中无法解决的蛋白活性困难。另外,钟鼎生物的 ZoonBac™ 昆虫蛋白表达服务配套的免费基因优化服务、蛋白设计分...