昆虫细胞杆状病毒表达系统(IC-BEVS)是一类应用广泛的真核表达系统,在高表达蛋白的同时,具有同大多数高等真核生物相似的翻译后修饰加工以及转移外源蛋白的能力。同时由于其不存在任何对哺乳动物有潜在威胁的动物病毒片段,自1983年引入BEVS技术以来,杆状病毒系统已成为用于重组蛋白表达的最通用、最强大的真核载体系统...
杆状病毒-昆虫细胞系统是一个由两个部分组成的二元系统。第一个部分就是杆状病毒表达载体,它是一个昆虫病毒,其功能显然就是将编码目标蛋白质的外源基因导人宿主细胞中。杆状病毒表达载体的另一个功能是为在晚期或极晚期启动子控制下的目标基因的转...
昆虫杆状病毒表达载体系统是以杆状病毒作为外源基因载体,以昆虫细胞作为宿主进行基因组自我扩增与目的蛋白的表达。构建重组杆状病毒的关键在于构建穿梭转移载体:将目的基因插入到 ph 或 p10 启动子下游的多克隆位点,因转移载体中含有与野生型杆状病毒进行重组的同源序列,所以转移载体与亲本病毒 DNA 进行重组时将获得携带有...
杆状病毒-昆虫细胞表达系统是利用杆状病毒作为载体,在昆虫细胞中表达外源蛋白的真核表达系统,具有表达效率高、插入外源基因容量大、对操作人员及环境无威胁等特点,同时能够对表达的外源蛋白进行翻译后修饰及加工等,使表达的蛋白具有生物学活性。本次讲座重点介绍了杆状病毒载体构建策略、重组蛋白表达及纯化方案优化等。
因此,系统了解这些复合体的生物学功能,将在健康和疾病方面 具有重要意义.由于内源性复合体存在低丰度和异质性特点,因而直接提取复合体存在一定的困难.杆状病毒-昆虫细胞表达系统 可成功表达复合体,为研究复合体的结构和功能提供新的手段.综述近年来利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统进行蛋白质复合体结 构和功能研究的进展...
杆状病毒-昆虫细胞表达系统是一个由两部分组成的二元系统。第一部分是杆状病毒表达载体,它是一个昆虫病毒,其功能是将编码目标蛋白质的外源基因导人宿主细胞中。杆状病毒表达载体的另一个功能是为在晚期或极晚期启动子控制下的目标基因的转录提供所需的转录复合物。通常采用目宿银纹夜蛾杆状病毒(AcNPV)作为表达载体。
杆状病毒载体表达系统的优势 1、安全性高:杆状病毒仅感染昆虫细胞,不感染其他脊椎动物,对人类健康没有不良影响。 2、高效的蛋白质表达:BEVS能够表达复杂或难以表达的蛋白质,例如各种酶类、寄生虫蛋白、糖蛋白等,并且能进行正确的蛋白质折叠和翻译后修饰。
杆粒生物研发团队深耕杆状病毒昆虫细胞表达系统二十余年,聚焦蛋白制品、亚单位疫苗和基因治疗等生物制品,围绕病毒载体开发和大规模生产工艺开发,取得了一系列自主知识产权(已授权8项国内发明专利,已申请1项PCT国际发明专利),打造出性能卓越的杆状病毒昆虫细胞表达系统qBac®。 qBac®杆状病毒/昆虫细胞蛋白表达系统,敲除...
一、昆虫细胞转染: 1.Sf9细胞计数,取6孔板中的两孔,每孔加入9×10 5个细胞(其中一孔设为正常对照),并以全培培养至少1小时,使细胞贴壁。 2.准备重组质粒和细胞转染试剂的混合物: a.溶解1μg纯化重组杆状病毒重组质粒于100μl无添加成分的Grace’s Medium。 b.转染试剂充分摇匀后取6μl加入100μl无添加成...