木聚糖酶基因克隆表达与木聚糖酶活力的测定 2000级生物技术专业,翁杰、张弢 木聚糖酶(endo-1,4-beta-xylanase E.C.3.2.1.8)是一类以内切方式专一性水解木聚糖分子中β-1,4-糖苷键的酶,其水解产物主要是木二糖和木寡糖。很多细菌和 真菌都可以产生木聚糖酶,有些木聚糖酶已被分离纯化并对其进行了性质研究,木
该试验尝试采用大肠杆菌中的优势密码子,以引物拼接的方式合成基因,利用pET-20b载体在16℃下实现木聚糖酶在大肠杆菌中高效表达。 1材料和方法 1.1引物设计 根据Genebank中疏棉状嗜热丝孢菌DSM 5826木聚糖酶A基因序列,在不改变氨基酸的前提下使用优势密码子,设计14条引物合成基因xynA,相邻引物末端有互补区域以利于引物...
结果与分析223.1牦牛瘤胃木质纤维素降解酶基因的筛选及木聚糖酶和木糖苷酶基因多样性分析223.1.1木质纤维素降解酶基因的筛选223.1.2 木聚糖酶基因多样性分析233.2 牦牛瘤胃微生物木聚糖酶基因簇的克隆与表达253.2.1 木聚糖酶基因簇的获得253.2.2 ORF30的克隆与表达253.2.3 ORF31的克隆与表达273.2.4 ORF33的克隆与...
本研究从酒糟中分离鉴定出的优势微生物为模板克隆木聚糖酶,为获得胞外具有高酶活且生长周期短的工程菌,故用被敲除八个细胞外蛋白酶的枯草芽孢杆菌WB800作为宿主菌表达目的基因,利用枯草芽孢杆菌的分泌型表达载体pHT43-HIS构建重组表达质粒,它带有IPTG诱导分泌信号序列,能够诱导物存在下引导表达外源蛋白分泌到细胞外,这...
热泉来源嗜热木聚糖酶基因的克隆、异源表达及其酶学性质研究 热度: 气体鼓泡强化超滤分离木聚糖酶和_木糖苷酶 热度: 摘要 摘要 木聚糖是植物中半纤维素的主要组成部分,其主链由木糖残基经D.1,4糖苷 键连接而成,其侧链由乙酰基,甲基葡糖醛酸基和阿拉伯呋喃糖昔基组成。因为 ...
木聚糖酶基因xynA在大肠杆菌中的高效表达
木聚糖酶基因的体外定向进化 杜文;王谦;王佳堃;刘建新 【摘要】木聚糖酶在天然材料中基因表达水平低、活性差、生产成本高,严重限制 了它的推广应用.宏基因组学通过免培养技术,研究生境中全部微小生物遗传物质的 总和,在开发微生物酶资源上具有强劲的优势.体外定向进化技术模拟达尔文的自然 进化论,利用基因的突变和...
木聚糖酶基因xynA在大肠杆菌中的表达研究 殷尔康(江苏畜牧兽医职业技术学院食品科技系,江苏泰州225300) 摘要 通过引物拼接的方式合成采用大肠杆菌优势密码子的疏棉状嗜热丝孢茵木聚糖酶基因xy,A,插入到热激质粒pHsh和质粒pET一 20b中构建重组质粒pHsh-xynA和pET-2Ob-xynA,再转入大肠杆菌JM1o9表达。经热激和IPTG...
2025年3月28日,欧洲食品安全局(EFSA)发布了一种转基因黑曲霉菌株产生的食品酶内切-1,4-β-木聚糖酶的扩展安全性评估报告。此前,该食品酶已获得授权用于生产烘焙产品和酿造产品。本次申请人请求扩展适用范围至加工非烘焙产品、水果...
葡聚糖和木聚糖等物质具有一定的粘度,添加在某些饮品中会影响口感或堵塞过滤装置。某实验室科研工作者采用构建共表达GluZ(葡聚糖酶基因)和XylB(木聚糖酶基因)两种融合基因的工程酵母,降低酿造饮品中的葡聚糖和木聚糖等物质含量以降低粘度。图1中PGK是酵母菌的特异性启动子,ADH为终止子,KanMX是遗传霉素抗性基因。GluZ...