7)在含有X-Gal、IPTG、Amp的L-琼脂平板培养基上培养,形成单菌落。计数白色、蓝色菌落。8)挑选白色菌落,使用PCR法确认载体中插入片段的长度大小。B)结果使用ControlInsert时的连接/转化结果如下,使用的感受态细胞的转化效率为:1.5108cfu/gpUC19DNA。ControlInsert连接/转化效率(cfu/gVector)白色菌落比率(%)效率(%)*...
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法,一般情况下,β-半乳糖苷酶的表达将受到破坏,重组克隆体在含有X-Gal、IPTG、Amp的L-琼脂平板培养基上培养时将显示白色菌落。但有时比较短的DNA片段插入载体时,基因的读码框有可能正好与LacZ的读码框相吻合,克隆体也会显示蓝色菌落。有报道称,2 kbp的DNA片段插入到载体中后,重...
应该是有影响的，因为X-gal是须要避光保存的。
如果是玻璃平板,并盖上盖子的话应该没啥影响,紫外透不过玻璃。 zhangrun0110 Originally posted by susizheng at 2010-09-15 10:00:53: 如果是玻璃平板,并盖上盖子的话应该没啥影响,紫外透不过玻璃。 好的,谢谢! zhangrun0110 Originally posted by susizheng at 2010-09-15 10:00:53: 如果是玻璃平板,并...
5. 取100μl培养液涂布到含Amp的LB琼脂平板表面。 6. 将平板置于室温直至液体被吸收。 7. 倒置平皿,于37℃培养,12~16小时后可出现菌落。 二.细菌的鉴定 1. 挑取单个菌落进行过夜细菌培养。 2. 按常规的方法进行质粒小量制备。 3. 用Xcm I内切酶按下面条件酶切提取的质粒DNA,如果大规模酶切,需要按比例增...
coliTOP10菌株,在含有IPTG和X-gal的LB平板上筛选。 蓝斑 + 白斑 第二组 A.将商品载体pGEM-TVector转化E. coliTOP10菌株,然后筛选,方法同上。 蓝斑 B.将商品载体pGEM-TVector用T4DNA连接酶作用后,转化E. coliTOP10菌株,然后筛选,方法同上。 蓝斑 第三组 将重组质粒(PODa片段...
含有X-Gal和IPTG的培养基4℃避光保存，须在1~2周内使用。
(5)加入100μl冰冷的0.1MCaCl2轻轻重悬菌体,冰浴2h后,4℃保存备用。 2.重组DNA的转化 (1)将含Amp、X-Gal、IPTG的LB平板37℃预热。 (2)于100μl感受态细胞中加入10μl连接产物,冰浴30min。 (3)将离心管转入42℃水浴,热冲击90秒,然后不要摇动离心管,迅速将其放在冰上2min。
导入以pUC19为载体的重组体后,受体细胞在涂布有Amp、IPTG和X-gal的平板上,能够正常生长的是转化子,蓝色的菌落是重组子,白色菌落是非重组的克隆子。A.正确B.错误的答案是什么.用刷刷题APP,拍照搜索答疑.刷刷题(shuashuati.com)是专业的大学职业搜题找答案,刷题练习的工具
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