在诱导剂IPTG的作用下具有活性的β-半乳糖苷酶可以使无色化合物X-gal降解生成深蓝色物质,从而使培养菌落变成蓝色。现在使用的许多质粒载体,如pGEM-TVector都带有一个E.coliDNA的短区段,其中含有β-半乳糖苷酶N端片段的编码信息及调控序列,在这个编码区中插入了一个多克隆位点,如果外源DNA...
在含有X-gal和IPTG物质的培养基上,大肠杆菌质粒上的lacZ'基因如表达出产物P- 半乳糖昔酶,则能使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落,因而易于识别。然而,当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37...
在含有X-gal和IPTG物质的培养基上,大肠杆菌质粒上的lacZ‘基因如表达出产物β-半乳糖苷酶,则能使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞。’请据图回答23.限制酶EcoRI的识别序列和酶切位点是-G↓,AATTC-,SmaI的识别序列和酶切位点是-CCC↓...
(4)大肠杆菌的质粒上含有LacZ基因,其编码的产物β半乳糖苷酶在X-gal和IPTG同时有在时,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。加入了X-gal和IPTG培养基被称为选择培养基,由于目的基因插入时破坏了LacZ基因,因此能够筛选出含目的基因的菌落是③,颜色是白色。 故答案为: (1)运载体(或载体) 限制性...
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下，在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落，因而易于识别。然而，当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物...
位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出b-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被b-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达b-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌...
许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ′基因(内含EcoRI的酶切位点),其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal 和IPTG存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色.基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞,过程如图所示.请据图回答: (1)限制酶EcoRⅠ的识别序列和酶切位点是-G...
在含有X-gal和IPTG物质的培养基上,大肠杆菌质粒上的lacZ′基因如表达出产物β-半乳糖苷酶,则能使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色.基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞.请据图回答: (1)限制酶EcoRI的识别序列和酶切位点是-G↓,AATTC-,SmaI的识别序列和酶切位点是-CCC↓...
大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因,其编码的产物β.半乳糖苷酶在X-gal和IPTG同时存在时,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。如图为利用该质粒进行的转基因过程,请据图回答下列相关问题: (1)图中切割目的基因时用到___种限制酶,而切割质粒时用到的限制酶是___。 (2)在基因工程的“四步曲”中,_...