昆虫细胞杆状病毒表达系统(IC-BEVS)是一类应用广泛的真核表达系统,在高表达蛋白的同时,具有同大多数高等真核生物相似的翻译后修饰加工以及转移外源蛋白的能力。同时由于其不存在任何对哺乳动物有潜在威胁的动物病毒片段,自1983年引入BEVS技术以来,杆状病毒系统已成为用于重组蛋白表达的最通用、最强大的真核载体系统...
昆虫杆状病毒表达载体系统是以杆状病毒作为外源基因载体,以昆虫细胞作为宿主进行基因组自我扩增与目的蛋白的表达。构建重组杆状病毒的关键在于构建穿梭转移载体:将目的基因插入到 ph 或 p10 启动子下游的多克隆位点,因转移载体中含有与野生型杆状病毒进行重组的同源序列,所以转移载体与亲本病毒 DNA 进行重组时将获得携带有...
该系统需要用三个杆状病毒表达载体(BEVs)同时感染草地贪夜蛾(Sf9)细胞,每个载体传递三个重要基因即ITR-GOI、Rep-Cap、Ad Helper来产生AAV,因此称为Three-Bac(如图1所示)。AAV载体的成功生产表明,AAV基因作为杆状病毒基因组的一个组成部分,在昆虫启动子的转录控制下传...
杆状病毒-昆虫细胞系统是一个由两个部分组成的二元系统。第一个部分就是杆状病毒表达载体,它是一个昆虫病毒,其功能显然就是将编码目标蛋白质的外源基因导人宿主细胞中。杆状病毒表达载体的另一个功能是为在晚期或极晚期启动子控制下的目标基因的转...
因此,系统了解这些复合体的生物学功能,将在健康和疾病方面 具有重要意义.由于内源性复合体存在低丰度和异质性特点,因而直接提取复合体存在一定的困难.杆状病毒-昆虫细胞表达系统 可成功表达复合体,为研究复合体的结构和功能提供新的手段.综述近年来利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统进行蛋白质复合体结 构和功能研究的进展...
杆状病毒载体表达系统的优势 1、安全性高:杆状病毒仅感染昆虫细胞,不感染其他脊椎动物,对人类健康没有不良影响。 2、高效的蛋白质表达:BEVS能够表达复杂或难以表达的蛋白质,例如各种酶类、寄生虫蛋白、糖蛋白等,并且能进行正确的蛋白质折叠和翻译后修饰。
杆状病毒表达载体的另一个功能是为在晚期或极晚期启动子控制下的目标基因的转录提供所需的转录复合物。通常采用目宿银纹夜蛾杆状病毒(AcNPV)作为表达载体。第二部分是宿主,通常是鳞翅类昆虫细胞系,但有时是鳞翅类的昆虫。 近年来,以杆状病毒为载体的昆虫细胞表达系统以其表达效率高,插入外源基因的容量大,对哺乳动物...
昆虫杆状病毒(Baculoviridae)是一种昆虫病毒,它们具有长而细的杆状结构,因此得名。它们由两个亚基因组组成,每个亚基因组包含两个或三个基因。这些病毒主要通过昆虫传播,在昆虫体内复制并感染昆虫细胞。它们可以感染蜜蜂、蚊子、苍蝇等昆虫,并且被认为是生物控制中的重要工具。
昆虫细胞非常适合进行外源基因的表达,所生产的蛋白大多具有生物活性和免疫原性,但与哺乳动物细胞相比,其糖基化修饰较为简单,成为该系统最大问题。 昆虫细胞糖基化主要是末端聚甘露糖修饰,而哺乳动物细胞主要…
杆状病毒代表一组不同的DNA病毒,它们能够感染各种(>600)昆虫细胞。它们是靶基因传递到宿主细胞的穿梭机。苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)具有高效表达蛋白的最佳表征,也是杆状病毒的模式种。它被广泛用于昆虫细胞介导的蛋白表达。昆虫细胞中重组蛋白的表达过程如图1所示。简而言之,将编码目的蛋白的基因插入初级载体...