此外,不同组织中提取的RNA,其中残留痕量RNase污染的几率也不同,为了防止痕量RNase的污染,从富含RNase的样品(如胰脏)中分离到的RNA需要贮存在甲醛中以保存高质量的RNA,对于长期贮存更是如此。从大鼠肝脏中提取的RNA,在水中贮存一个星期就基本降解了,而从大鼠脾脏中提取的RNA,在水中保存3年仍保持稳定。为了增加贮存RNA...
摘要:采取异硫氰酸胍法从斑马鱼的3个样品中提取和纯化RNA,结果表 明,RNAA260分别为0,587,0719, 0.151AⅫ/A28o比值分别为1.89,1.92,1.82.电泳条带也清晰可见,可以用于进一步 的分子生物学研究. 关键词:斑马鱼;RNA提取;异硫氰酸胍法 中图分类号:Q503文献标识码:B文章编号:1008—9632(2007)06—0067—02 RNA的提...
实验一斑马鱼总RNA的提取 【实验目的】 1、掌握提取总RNA的原理和技术。 2、学习和掌握控制RNA酶活性的方法。 【实验原理】 分离纯净、完整的RNA对于分子克隆的实验是很重要的,而且是进行基因表达分析的基础。在总RNA中,75-85%为rRNA(主要是28S-26S/23S和18S/16SrRNA),其余的由分子量大小和核甘酸序列各不...
现在大部分实验室里都有提取DNA和RNA的试剂盒.试剂盒里配备各种配制好的试剂,同时附有提取DNA和RNA的详细方法步骤.过程简单的来说就是先将肝脏弄碎,然后用一系列试剂使细胞裂解,除去蛋白质等杂质,然后就将杂质溶夜经... 分析总结。 过程简单的来说就是先将肝脏弄碎然后用一系列试剂使细胞裂解除去蛋白质等杂质然后...
斑马鱼rna提取,纯化,逆转录实验报告 组织RNA提取与逆转录PCR步骤 RT—PER: 1、,取2ulRNA模板,70℃预变性10min 2、冰浴5min 3、按顺序加入以下试剂:(20ul体系) 25mmol/L的MgCl24ul 逆转录缓冲液2ul 10mmol/LdNTP2ul RNase0.5ul AMV15ul 随机引物或特异下游引物1ul ...
斑马鱼总RNA提取和纯化 维普资讯 http://www.cqvip.com
(1)为确定HuC基因的转录起始位点,提取斑马鱼早期胚胎神经细胞的总RNA,以与互补的一段单链DNA序列作为义务引物,加入酶,获得cDNA.对该cDNA的序列进行测定,与HuC基因的序列比对,确定转录起始位点,定为+1号碱基,其上游的碱基定为负值. (2)为了探究转录起始位点上游不同长度片段在基因转录中的作用,科研人员从(选填“基...
我是第一次提，用的QIAGEN的RNeasy Mini Kit试剂盒，每个样品72hpf的斑马鱼20条。那这次提的是不是就...
斑马鱼总RNA提取和纯化 采取异硫氰酸胍法从斑马鱼的3个样品中提取和纯化RNA,结果表明,RNA A260分别为0.587、0.719、0.151.A260/A280比值分别为1.89、1.92、1.82.电泳条带也清晰可见,可以用于进一步的分子生物学研究. 作者: 谢保胜 藤原滋树 XIE Bao-sheng Shigeki Fujiwara 作者单位: 谢保胜,XIE Bao-sheng(青海...
目前,最常用的RNA纯化方法是使用异硫氰酸胍/酸性酚的一步法。异硫氰酸胍-苯酚法的基本过程是:先将样品(以动物的腺体或组织为例)放进匀浆器中加入异硫氰酸胍变性液进行匀浆裂解,再用酸性苯酚(水饱和酚)、氯仿抽提除去DNA和变性的蛋白质,最后用异丙醇沉淀出RNA。Trizol试剂法进一步提高了RNA的提取能力,可以从多种组织...