数字PCR (Digital PCR, dPCR) 是一种将样本微分化为多个独立反应单元的技术,让每个反应中出现零个、一个或多个靶标分子。这种方法使得在强阴性信号背景下检测单个阳性信号这一典型的大海捞针问题变得异常容易。这类情况需要更低的检测下限,因而标准的实时定量 PCR (quantitative PCR, qPCR) 法不再可行。
数字PCR被称为第三代PCR,是一种高精度的核酸定量检测技术,相比于荧光定量PCR,数字PCR具有不依赖于标准曲线、操作更简单、灵敏度和精度更高(±10% copies/μL)、可实现多重甚至超多重核酸定量、更加适合低丰度目标的检测等优势。 2. 数字PCR的精度和检测方法 相比于其他的核酸定量技术(如分光光度计、荧光定量PCR...
数字PCR是一种新兴的PCR技术，它将传统的PCR扩增与微流控技术相结合，通过分割样品为数千至数万个微滴，使每个微滴包含或不包含目标DNA分子，从而实现绝对定量。数字PCR系统具有灵敏度高、准确性好、可重复性强等特点，特别适用于低拷贝数基因表达分析、基因突变检测、稀有基因突变筛选等领域。二、工作原理 数字PCR...
分配到不同的反应单元,每个单元包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA 模板) ,在每个反应单元中分别对目标分子进行PCR扩增,扩增结束后对各个反应单元的荧光信号进行统计学分析,有荧光信号记为1,无荧光信号记为0(不同于qPCR 对每个循环进行实时荧光测定的方法,数字 PCR 技术是在扩增结束后对每个反应单元的荧光信号进行...
数字PCR被称为“第三代PCR技术”,其最大的特色是将单个核酸分子分配到独立的反应室,经过PCR扩增反应和荧光信号检测,实现单分子定量。数字PCR技术不依赖Ct值和标准曲线,同时具有极高的灵敏度、准确度和极佳的重复性,是超越实时荧光PCR的一种绝对定量分析技术。
数字PCR技术,凭借其独特的绝对定量能力和高灵敏度特性,正逐步在肿瘤精准诊疗领域大放异彩,展现出前所未有的应用潜力,为肿瘤的早期诊断、治疗方案的制定以及疗效评估等提供了有力支持。 近日,在一年一度的IVD行业盛会——第二十一届中国国际检验医学暨输血仪器试剂博览会(CACLP)罗氏诊断卫星会上,重庆大学医学院罗阳教授...
数字PCR (digital PCR, dPCR)是在普通PCR和定量PCR基础上发展的第三代PCR技术,通过有限稀释和泊松分布统计实现精确的绝对定量检测。相比于前两代PCR技术,dPCR能够实现DNA模板的绝对定量且对PCR抑制剂具有更强的耐受性。目前,该技术在致病菌和病毒、基因突变、甲基化DNA、转基因成分和食品掺假的检测中都得到了广泛的...
数字PCR技术,凭借其独特的绝对定量能力和高灵敏度特性,正逐步在肿瘤精准诊疗领域大放异彩,展现出前所未有的应用潜力,为肿瘤的早期诊断、治疗方案的制定以及疗效评估等提供了有力支持。 近日,在一年一度的IVD行业盛会——第二十一届中国国际检验医学暨输...