在研究核蛋白及其相关功能的过程中，人肝脏细胞系统同样发挥着不可或缺的作用。肝脏细胞作为体内重要的代谢和解毒器官，其细胞系统与核蛋白的相互作用关系密切。通过深入探讨人肝脏细胞系统在核蛋白代谢和功能发挥过程中的作用，可以进一步揭示核蛋白在人体内的生理和病理机制。人脐带细胞系统：在核蛋白及其相关功能的研究...
核蛋白提取方法 BestBio贝博 蛋白提取 细胞检测1 人赞同了该文章 实验样本为动物的细胞或者组织,提取核蛋白,下游做WB IP 酶活检测等 可以参考下贝博 BB-3102 细胞蛋白提取 1. 提取液制备: 每300ul冷的蛋白提取液A加入1ul蛋白酶抑制剂混合物和1ul磷酸酶抑制剂。每200ul冷的蛋白提取液B中加入1ul蛋白酶抑制剂...
1. 4oC,最高速 (14000-16000 rpm) 离心 5 分钟 2. 将上清液(上清为胞浆组份)转移到一个新的预冷的 1.5 ml 离心管中。将沉淀(可选优化:用 0.5 ml 预冷 PBS 重悬,10000 rpm,离心 3-5 分钟清洗沉淀可以减少胞浆蛋白污染)中加入适量的胞核提取缓冲液,涡旋大力震荡 15 秒,冰上孵育 1 分钟。 然后重复...
7. 置冰上40分钟,每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。 8. 在4℃,16000×g条件下离心10分钟。 9. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到核蛋白。 蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。 吉至试剂核蛋白提取试剂盒操作简单、方便,从培养细胞或新鲜组织中提核蛋白、整个过程只需60分钟即可将核蛋白和浆蛋白...
用冷PBS洗涤两次，吸干上清。每20ul细胞加入200μl Buffer A、2ul抑制剂，涡旋15秒后冷藏10分钟，再涡旋5秒离心5分钟。上清收集，胞浆蛋白保存于冰或-80℃。沉淀中加入200μl Buffer B、2ul抑制剂，冷藏40分钟，每10分钟搅拌，离心10分钟。上清收集，得到核蛋白。组织蛋白提取步骤:剪碎组织，加冷...
蛋白-细胞核蛋白提取方法提取细胞核蛋白的步骤: 1.向培养细胞的平皿中加入少量(保证在1.5ml TUBE内能放下)冷PBS(或1*D-Hanks) 2.,用细胞刮刀尽可能多的刮下细胞,收集到1.5ml的离心管中。 在预冷的离心机中,4度,1000rcf,1-3分钟,沉降细胞。 为尽可能多的获得细胞,可将一次离心后的上清再重复刮细胞一次;...
8.转移上清液（细胞质蛋白）到一个新的冷冻管中 9.用悬浮颗粒5倍体积的isotonic lysis buffer悬浮细胞...
进一步,步骤B中,将步骤A所得核蛋白粗提液冰浴超声,40瓦功率条件下每10毫升体 积的核蛋白粗提液超声5分钟,IOOOOOXg离心1小时,取上清液,核蛋白存在于所述上清液 中; 进一步,所述核蛋白为非变性核蛋白。本发明的有益效果在于在细胞裂解液处理的基础上,联合使用超声裂解的方法, 避免大量的核蛋白随DNA —起沉淀...
使用方法: 1. 提取液制备:每500ul预冷的.核蛋白提取液A和200ul提取液B中分别加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。 2. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200mg植物组织样本剪碎,采用以下一种方 法处理: i. 加入500ul提取液A后用匀浆机/匀浆器匀浆。 ii. 置于研钵中用液氮研磨,研磨后加入500μ...
方法: 1、分别应用Dounce匀浆器研磨法、试剂盒提取法和涡旋破膜法提取HeLa细胞核蛋白; 2、Bradford法测定蛋白浓度; 3、Western blot检测标志性胞浆蛋白和核蛋白; 4、双向电泳后银染扫描图像,PDQuest8.0分析图像。 结果:涡旋法获得核蛋白的过程所需时间最短;核蛋白提取试剂盒和涡旋法能够较快速的获得相对较纯的核蛋...