本发明涉及细胞分离领域,公开了一种小鼠肝星状细胞分离,提取与培养的方法.该方法包括以下步骤:准备12周以上的成年小鼠,灌流得到体内消化后的肝脏,经加双抗的DMEM多次清洗后,进行肝脏的捣碎,捣碎后的肝脏经胶原酶和链霉蛋白酶混合液,37℃水浴锅中消化10分钟后,过200目滤网,经离心,去上清,密度梯度离心后,用肝星...
小鼠原代星状细胞提取方法 大鼠原代星状细胞提取方法 1、原位灌注:1、1ml 5%水合氯醛麻醉大鼠,腹壁酒精消毒,十字切口打开腹腔,用湿棉签将肠管推向左侧,暴露门静脉和下腔静脉。2、将充满灌流液的针(0.45或0.55的头皮静脉针)经小口插入门静脉(不要插的过深),止血夹或线结扎,软管部分用纸胶布固定以免...
免疫荧光等方法验证纯化细胞的纯度.结果 两层Percoll法提取枯否细胞和两层OptiPrep法提取肝星状细胞可行,纯度可达90%以上,细胞得率为1~2×10~7/肝,细胞存活率在90%以上.细胞原代培养48 h后,枯否细胞F4/80阳性细胞,肝星状细胞α-SMA阳性细胞均达90%以上.结论 小鼠肝中枯否细胞和肝星状细胞的分离提取方法完善...
本发明涉及细胞分离领域,公开了一种小鼠肝星状细胞分离、提取与培养的方法。该方法包括以下步骤:准备12周以上的成年小鼠,灌流得到体内消化后的肝脏,经加双抗的DMEM多次清洗后,进行肝脏的捣碎,捣碎后的肝脏经胶原酶和链霉蛋白酶混合液,37℃水浴锅中消化10分钟后,过200目滤网,经离心,去上清,密度梯度离心后,用肝星...
中提取富集的部位,主要含有酸浆苦素型的睡茄内酯类化合物.本实验通过建立四氯化碳及胆总管结扎诱导的小鼠肝纤维化模型,以及转化生长因子β1 (transforming growth factor-β1,TGF-β1)处理诱导的人肝星状细胞LX-2活化模型,结合不同浓度的WEP处理,研究WEP对肝纤维化的治疗作用,并探讨潜在的作用机制.本文中所有动物...
(54)发明名称一种小鼠肝星状细胞分离、提取与培养的方法(57)摘要本发明涉及细胞分离领域,公开了一种小鼠肝星状细胞分离、提取与培养的方法。该方法包括以下步骤:准备12周以上的成年小鼠,灌流得到体内消化后的肝脏,经加双抗的DMEM多次清洗后,进行肝脏的捣碎,捣碎后的肝脏经胶原酶和链霉蛋白酶混合液,37℃水浴...
方法以体内胶原酶灌注消化为基础,使用 Percoll、OptiPrep 等不同的试剂和浓度梯度分 别提取 C57BL/ 6 小鼠的肝枯否细胞和肝星状细胞,并通过流式细胞仪、免疫荧光等方法验证纯化细胞的纯度。 结果两层 Percoll 法提取枯否细胞和两层 OptiPrep 法提取肝星状细胞可行,纯度可达 90%以上,细胞得率为 1 ~ 2× 10 ...
方法以体内胶原酶灌注消化为基础,使用 Percoll、OptiPrep 等不同的试剂和浓度梯度分 别提取 C57BL/ 6 小鼠的肝枯否细胞和肝星状细胞,并通过流式细胞仪、免疫荧光等方法验证纯化细胞的纯度。 结果两层 Percoll 法提取枯否细胞和两层 OptiPrep 法提取肝星状细胞可行,纯度可达 90%以上,细胞得率为 1 ~ 2× 10 ...