细菌接合是一种强大的工具,用于将DNA从大肠杆菌转移到包括链霉菌在内的各种细菌中。在这种方法中,孢子通常被用作遗传信息的受体细胞。然而,一些工业上重要的链霉菌不产生孢子,使得它们的遗传操作变得困难。在这些菌株中,使用机械破碎的菌丝体可以实现低效的DNA转移。蓝色链霉菌(Streptomyces peucetius var. caesius)是一...
1️⃣1️⃣ 涂布稀释后菌液: 原始菌液和稀释后菌液各取100μl,涂布于(含有固有抗性+质粒抗性)的平板上,37℃培养24-48h。1️⃣2️⃣ 纯化和鉴定: 挑单菌落,于(含有固有抗性+质粒抗性)的平板上纯化一次,转到液体LB(含有固有抗性+质粒抗性),37℃培养过夜,PCR扩增鉴定接合转移成功的菌株,或者直接...
3.沙门菌中往往同时携带多个不同的质粒,因此获得只含有单一靶向质粒的接合子是很重要的,作者基于此设计了两步法转移,第一步是用平板法将野生型菌株中的质粒转移至大肠埃希菌J53当中,第二步将感兴趣的质粒从J53转移至一株缺乏靶质粒的...
3.coli S17-1/λπ respectively,and sequently the conjugation was carried on.然后利用 mini-Tn5转座子,通过接合转移,将两个带有不同启动子的绿色荧光蛋白基因分别整合到荧光假单胞菌 P303染色体上,获得了在488nm 波长下发光稳定的 P303m1和 P303m3菌株。 英文短句/例句 1.Mechanism of Al_2O_3 Nanopart...
答:接合是供体菌和受体菌直接接触,供体菌通过性菌毛将所带有的F质粒或类似遗传物质转移至受体菌的过程。能通过接合方式转移的质粒有F质粒、R质粒、Col质粒和毒力质粒。染色体基因通常不能通过接合方式转移,但染色体基因可以F´质粒或Hfr形式通过接合方式转移。原因如下:F质粒有时可以整合到细菌的染色体上,由于整合有...
它是介导细菌间基因水平转移的关键要素 。接合转移关键基因能促使质粒在不同细菌细胞间移动 。这些基因的表达可调控接合转移的起始过程 。某些接合转移关键基因负责识别合适的受体细胞 。接合转移关键基因参与形成细胞间的连接通道 。基因traA是常见的接合转移关键基因之一 。它编码的蛋白对于性菌毛的组装至关重要 。性菌...
1.3.4 质粒膜接合实验 基于IncI1和IncN质粒阳性菌株及受体菌药敏性结果,选择分别携带IncI1质粒和IncN质粒的沙门氏菌作为供体菌,不含该2 种质粒的大肠杆菌和沙门氏菌为受体菌,采用膜过滤法进行接合。接合方法如下:取OD600 nm为0.6的供体菌和受体菌菌液各1 mL于5 mL LB肉汤中混匀,转入孔径0.22 μm的滤器过...
细菌可移动遗传元件(mobile genetic elements, MGE),如接合质粒和整合性接合元件(Integrative and conjugative element, ICE),是细菌致病性和耐药性传播的重要载体。接合性质粒和ICE的接合转移区通常由四个模块组成:转移起点(oriT)区,松弛酶 (relaxase),IV型伴侣蛋白 (type IV coupling proteins, T4CP)和细菌...
接合转移是指供体和受体细胞间直接接触,质粒DNA从供体向受体转移的过程。质粒可分为可转移质粒和非转移质粒两类,转移质粒带有完整的编码转移酶的tra基因,质粒能自主地从一个细胞转移到另一个细胞,甚至还能带动供体细胞的染色体DNA向受体细胞转移,这类质粒常被称为自主转移质粒。如大肠杆菌的F质粒。有些质粒不含tra...