在探针法熔解曲线实验中,首先准备好待测物质的样品。通常会将样品放置在一个小容器中,例如玻璃管或钨丝网。 然后,将探针插入样品中。探针通常是一个细长的金属棒或导热电阻。 在实验过程中,会通过加热或降温样品,从而引起样品的熔化或固相转变。通过监测探针的热导率变化,可以得到样品温度与时间的关系。 最终,可得...
探针法熔解曲线分析是一种利用特异性探针结合到目标DNA序列上的技术,随后通过对探针与目标DNA结合状态的温度依赖性检测,来识别和定量特定的DNA或RNA序列。这种方法的关键在于,当探针与目标序列完全匹配时,其熔解温度(Tm值)会较高;而如果存在单核苷酸多态性(SNPs)或其他变异,则会导致Tm值下降。因此,通过比较不同样本...
1.熔解曲线法(Melting Curve Analysis):熔解曲线法是一种通过监测DNA在升温过程中解离的过程来分析其特征和组成的方法。该方法主要包括以下步骤:将含目标DNA的样品升温,DNA在一定温度范围内解离成单链,同时监测溶液的荧光强度,然后绘制出温度-荧光曲线。熔解曲线图上的峰值和峰型可以提供有关样本中存在的DNA序列、浓度...
4. 探针法熔解曲线的原理 虽然染料法可以解决很多问题了,但是随着技术的进步和不断提高的特异性的要求,目前大家更多的开始使用荧光标记的探针替代荧光染料来标记PCR产物,探针法的标记灵敏性特异性,可设计性都比较高,加之有更多的荧光通道,因此尤其对多重靶标的检测适合性更好。 ...
你看啊,这探针法熔解曲线就好比是一场独特的舞蹈表演。那些核酸分子就像是一个个灵动的舞者,它们在特定的条件下开始跳动。而探针呢,就像是专门为这些舞者设计的独特标记。 当温度慢慢升高的时候,就好像是给这场舞蹈加了一把火,让舞者们的动作开始发生变化。原本结合在一起的核酸和探针,也会随着温度的变化而逐渐分...
在国家药品监督管理局(National Medical Products Administration)中应用多色探针熔解曲线法在结核分枝杆菌耐药突变检测领域的产品,主要集中在厦门致善生物科技股份有限公司,药品检测包括乙胺丁醇、异烟肼、氟喹诺酮、链霉素、利福平及相关基因突变检测。具体如下表: ...
多重扩增探针熔解曲线法(multiplex PCR probe melting curve analysis)是一种通过PCR反应和DNA探针的熔解曲线分析技术来检测多个目标序列的方法。 该方法利用PCR反应同时扩增多个目标序列,每个目标序列都有一个特异性的DNA探针与之配对。在PCR反应过程中,DNA探针会与特定的目标序列结合并产生一个荧光信号。通过升温过程,...
PCR-熔解曲线法 PCR荧光探针熔解曲线技术的主要原理是:针对待检测的位点,设计分子信标探针;在PCR扩增完成后,将扩增产物与分子信标探针进行杂交,然后缓慢升高温度,做探针与产物的熔解曲线分析,根据熔解峰对应的温度,读取该位点的基因多态信息。相比其他方法具有操作简单、准确性高、特异性好、结果易判等优势。
2.淬灭基团的选择 题主只说了荧光基团用的是VIC，淬灭基团呢？可以使用超级淬灭探针（Super Quencher, ...
摘要:目的:评价探针熔解曲线法检测结核分枝杆菌利福平(RIF)、异烟肼(INH)、乙胺丁醇(EMB)及链霉素(SM)耐药突变的方法学应用价值。 方法:用PCR探针熔解曲线法检测110株结核分枝杆菌临床分离株RIF、INH、EMB及SM耐药突变情况,以传统的比例法药物敏感性试验检测结果为标准,评价探针熔解曲线法的敏感性、特异性和一致率,并...