如果你只是简单的从混合菌落中挑选了一团细菌,然后在液体培养基中培养,那么突变的细菌就有可能会接管整个培养物,从而影响您的实验。我们可以通过划线挑选单个菌落的方式来解决问题。在这种情况下,每个单独的菌落就是单克隆,即它们在遗传学上是相同的。使用这些单克隆菌落形成的液体培养物,将会获得预期的质粒产率并在后...
单克隆有条带就说明转入了,不用再次划线。后续需要再次活化菌株可以再划线。划线长出来的菌可能在扩繁...
挑取单克隆菌落后摇菌条件应是()。A.200rpm;37℃培养12hB.180rpm;37℃培养12hC.180rpm;37℃培养24hD.180rpm;30℃培养12h
1. 挑取转化的单克隆菌落 接种于 5ml 含有相应抗生素的 LB 液体培养基中 37℃下300rpm 振荡培养过夜 12-16h 。 2. 将 1.5ml 培养物加入 EP 管中 4℃以最大速度 13000g 离心 30s 剩余的原始培养物贮存于 4℃。 3. 尽可能吸尽离心管里的上清液。 4. 加入 100μ l 冰预冷的碱裂解液Ⅰ 剧烈震荡将...
之前摇菌时加抗生素了吗?如果没有就不能说是阳性菌。如果加了,应该是操作的问题。保证你每步操作都是正确的。包括培养基配制、接种过程、摇菌环境。
然后用的是kana筛选,挑取单克隆后,摇床培养12个小时后,出现些许混浊,但是继续培养后,菌好像就不...
转化后涂布(已加抗生素),阴性对照培养皿上长有一两个菌落,能否在阳性对照的平板上挑取单克隆,进行后续的实验(摇菌、保种、提质粒、酶切鉴定...阴性对照是不应该长菌的,就算是一两个,但是它确实长了,性质上说是染菌了,那么阳性对照的实验能否继续?为什么?如果可以的话,阴性对照上有一个两染菌影响不大,那再多...
单克隆跑电泳怎么又很多条带? 片段和载体连接后,做克隆,然后挑取单个菌落,扩大培养后用菌液跑电泳,发现电泳带不是一条而是有很多条?这是什么原因呢?
我打算提取质粒,pet21a / 28a 转化到DH5a 涂平板后,挑取单克隆跑PCR,条带全是100以下的。请问谁...
转化后涂布(已加抗生素),阴性对照培养皿上长有一两个菌落,能否在阳性对照的平板上挑取单克隆,进行后续的实验(摇菌、保种、提质粒、酶切鉴定...阴性对照是不应该长菌的,就算是一两个,但是它确实长了,性质上说是染菌了,那么阳性对照的实验能否继续?为什么?如果可以的话,阴性对照上有一个两染菌影响不大,那再多...