需要进一步利用Co-IP验证Nedd8与细胞裂解液中的NAE1、UBA3、Ubc12、和靶蛋白相互作用,此外还可以进一步通过转染NEDD8突变体或拟素化抑制剂进行验证,利用碱基点突变技术确认拟素化位点,目前常用的拟素化修饰抑制剂为小分子
拟素化(Neddylation)是近年来发现的一种类似泛素化的蛋白质翻译后修饰过程,涉及一个三步的酶促过程,可以通过多种方式调节蛋白质的活性。但泛素化的作用仍然很大程度上未知。 研究思路 在本篇文章中,作者首先在小鼠体内验证肝拟素化作用受到营养物质利用率的调节。接着作者在小鼠中使用四种拟素化损伤模型,发现拟素化...
报道了拟素化修饰通过CRL3SPOP E3泛素连接酶调控肿瘤细胞的谷氨酰胺吸收和代谢。研究人员前期工作发现，使用小分子MLN4924抑制拟素化修饰，可以诱导线粒体从分裂向融合的动力学转换，破坏线粒体功能，并通过激活PKM2促进糖酵解【9】。非靶向代谢组学研究指出拟素化修饰在整体上显著调控细胞代谢，通过分析细胞代谢通路，...
03 肝拟素化调节胰高血糖素、肾上腺素和糖皮质激素的糖异生作用 在四种模型中,拟素化缺乏均显著降低了激素治疗的高血糖效应(图2)。因此,拟素化介导了葡萄糖反调节激素的作用,并且是HGP所必需的。 图2 拟素化是反调节激素的糖异生作用所必需的 04肝拟素化与胰岛素抵抗相关l 作者用高脂肪饮食(HFD)喂养小鼠短...
因此,拟素化修饰与蛋白泛素化降解紧密关联【3】。孙毅课题组前期通过非靶向代谢组学研究,发现拟素化修饰在整体上显著调控细胞代谢【4】,细胞代谢通路通过分析显示谷氨酰胺代谢变化最为显著。阻断拟素化修饰后,肿瘤细胞谷氨酰胺吸收及其代谢显著增加【5】。在一些肿瘤中,为维持谷氨酰胺代谢的有序进行,谷氨酰胺代谢...
本研究揭示了营养胁迫和（或）糖尿病发生时拟素化修饰调控葡萄糖代谢稳态的新机制。作者首先探究了营养适应性是否会影响拟素化水平，发现饥饿处理会上调小鼠肝脏拟素化程度，而重新饲喂会降低拟素化，该变化受到“瘦素-受体”依赖性机制的介导。靶向NAE1或NEDD8抑制肝脏拟素化后，小鼠糖异生能力下降而导致血糖水平...
非靶向代谢组学分析指出拟素化修饰在整体上显著调控细胞代谢,通过分析细胞代谢通路,发现谷氨酰胺代谢变化最为显著。细胞实验表明,阻断拟素化修饰后,肿瘤细胞谷氨酰胺吸收及其代谢显著增加;且仅有谷氨酰胺转运体ASCT2/SLC1A5水平增高。增...
为明确拟素化修饰抑制后ASCT2累积的机制,结合生物信息学和生化实验,研究者发现ASCT2蛋白含有CRL3 E3泛素连接酶中接头蛋白SPOP经典结合基序,SPOP促进ASCT2蛋白的K48连接的多聚泛素化降解,降低其稳定性。有趣的是,SPOP自身的水平也受环境中谷氨酰胺的调节:在剥夺谷氨酰胺后,SPOP不能形成二聚体,触发SPOP的自身泛素化...
拟素化(Neddylation)是近年来发现的一种类似泛素化的蛋白质翻译后修饰过程,涉及泛素样分子NEDD8与蛋白质赖氨酸残基的共价结合,是蛋白质调控的重要机制【1】。拟素化广泛存在于真核细胞中,参与各种细胞过程,包括细胞分裂、细胞凋亡、信号传导和细胞粘附。拟素化过程由NEDD8激活酶 (NAE1)、NEDD8连接酶和E3连接酶催化...
Neddylation修饰和结直肠癌巨噬细胞免疫逃逸存在显著相关性 质谱数据进一步表明,酪氨酸磷酸酶 SHP2可以发生拟素化修饰,并且SHP2的拟素化在CD47结合并识别巨噬细胞SIRPα后显著减弱。作为一种非受体型酪氨酸磷酸酶,SHP2依赖其自身构象变化行使酶活。分子对接和动力学模拟结合生化实验证明,SHP2在K358和K364位点发生拟...