1、野生型拟南芥培养 野生型拟南芥培养至抽薹开花,可在刚抽薹时将主花序剪掉,使其长出更多的莲座分枝和花序。。 植株健壮,在初花期侵染效果最好。 在转化前一天将花朵和荚果剪掉,培养基质浇水浇透。 2、制备转化用的农杆菌菌液 在灭菌15-20分钟后的超净台中,往灭菌 500mL三角瓶中加入液体LB 200mL、50ng/μL...
利用农杆菌转化法,将抗逆基因转入至拟南芥(2n=10)中,获得不同株系的拟南芥. (1)从农杆菌中获得带有潮霉素抗性基因(H基因)的Ti质粒,将抗逆基因插入到Ti质
综上所述,农杆菌转化拟南芥时所需的悬浮液量并不是一个固定的数值,而是需要根据实验条件、菌液浓度和浸染时间等多个因素进行综合考虑。在实际操作中,研究人员可以通过预实验来确定最佳的悬浮液使用量,以确保高效的转化率和良好的实验结果。 此外,值得注意的是,农杆菌转化实验中...
共转化农杆菌:于中午12点接菌于有YEP培养液的试管中10ul:10ml接种。28℃,3000rpm摇过夜,约30小时,次日下午6点将已摇活的菌按(1:400)及750ul菌液转至汉300毫升YEP+K50+Rif中培养28℃,300rpm约14小时,次日上午8点测OD值,用YEP+Rif作为空白对照,当菌液达到OD600为1.5~3.0之内时,可收集菌体于250ml离心瓶(...
农杆菌转化拟南芥1.农杆菌感受态制备① 从 YEB 平板培养基上挑取农杆菌单克隆,接种于 5 mL YEB (含 50µg/mL 利福平)液体培养基中,28ºC,200 rpm,过夜培养;②取2 mL过夜培养液接种于50 mL上述含有利福平的YEB液体培养基中,28ºC,200 rpm,摇床培养至 OD 达
农杆菌介导拟南芥的转化 实验原理 浸花法 双子叶植物 无宿主限制，技术限制 叶盘法原生质体共培养创伤植物感染法 原生质体培养 农杆菌介导拟南芥的转化 实验原理农杆菌的感染与生存 农杆菌介导拟南芥的转化 实验原理 技术应用 一种方便，高效的植物转基因方法，多用于转化双子叶植物，经过改进后也逐渐用于单子叶植物...
农杆菌侵染拟南芥花序的转化方法 转化农杆菌: GV3101农杆菌感受态从-80℃取出,冰上融化,加入2-5ul质粒,去郭老师实验室电激转化(拿杯,洗,,吹干,预冷,加菌液,对准方向插杯,AAgr程序,激完后看时间2.2hv、5.0s左右,每次需确定程序,需带的东西:镊子、枪、枪头、吹风机、纸、水、废液缸),激后往杯中加入200ul...
【题目】利用农杆菌转化法可将抗病基因(来自拟南芥)导入玉米细胞而获得抗病植株。根据所学知识回答下列问题: (1)若对拟南芥的抗病基因进行大量扩增,应用___技术。 (2)获得抗病玉米植株过程中的核心步骤是___,其目的是使抗病基因在受体细胞中稳定存在,并能遗传给下一代,同时使___。 (3)农杆菌转化法利用农杆菌...
1、实验四.农杆筲转化炮草和拟南芥Nicotiana tabacumArabidopsis thaliana选择标勺己基 因 与扌艮告基 因UXJzCg S R3|必备条件:编码一种不存在于正常植物细胞中的酶基因较小能在转化体中得到充分表达检测容易,并且能定量分析选择标记基因与筛选标记基因:“pt新霉素磷酸转移酶基因(卡那,新霉素,G418), aat (链霉素...
发育生物学实验 2016年 一、拟南芥简介 二、实验技术---农杆菌介导拟南芥转化 实验1拟南芥室内培养观察及 农杆菌转化拟南芥 农杆菌介导拟南芥的转化 实验目的 1、学习真核生物的转基因技术及农杆菌介导的转化原理 2、掌握农杆菌介导转化拟南芥的实验方法 3、了解拟南芥的生理特点及在基因工程实验中应用。 实验材料 农...