将农杆菌加入含有卡那和利福平抗性的50mlLB培养基中,放入28℃摇床,过夜培养,让菌液OD值达到0.8-1.0。 📈停止摇菌后,28℃、6000rpm离心10分钟,准备侵染液啦! 💧配置侵染液:50ml菌液配50ml侵染液,加入0.11gMS、蔗糖2.5g(同1/2MS培养基),再加入10微升表面活性剂。 🌼侵染步骤来啦!采用浸花法侵染20-30秒,...
1、野生型拟南芥培养 野生型拟南芥培养至抽薹开花,可在刚抽薹时将主花序剪掉,使其长出更多的莲座分枝和花序。。 植株健壮,在初花期侵染效果最好。 在转化前一天将花朵和荚果剪掉,培养基质浇水浇透。 2、制备转化用的农杆菌菌液 在灭菌15-20分钟后的超净台中,往灭菌 500mL三角瓶中加入液体LB 200mL、50ng/μL...
农杆菌侵染拟南芥方法33将保鲜膜铺在桌子上或地上将植株的花序和茎茎上的腋芽浸入侵染液静置3060s拿出放置于保鲜膜上包起来包住盆的一部分和植株全部平着放入黑色塑料袋内或者盆内遮光即可 农杆菌侵染拟南芥方法 植株准备:养的壮壮的,可以适时打顶,剪掉顶端,长更多侧枝。 1.冻融法转化农杆菌 1.1 目的质粒与农杆菌...
农杆菌侵染拟南芥拟南芥侵染方法: 1、取150ml含相应抗生素的液体LB培养基,接入2-3ml准备好的农杆菌菌液,大摇过夜至培养基由红色转为黄色。 2、将培养后的150ul农杆菌菌液导入灭过菌的50ml离心管中,4℃,3000rmp离心15min 3、弃上清,加入50ml 1/2 MS,将菌泥搅起 4、将培养4周左右,刚开花的拟南芥植株上的...
首先需要进行农杆菌预培养,将农杆菌接种到LB培养基中,37℃下静置过夜,直至细菌生长到对数期(OD600约为0.6)。 2.2 溶液配置 将农杆菌和拟南芥细胞混合,使其在一定的条件下发生共生关系。具体操作步骤如下: 1)在10ml的LB培养基中加入1ml的农杆菌预培养液,将其在37℃下振荡培养...
农杆菌侵染液(拟南芥专用) 英文名称:Agrobacterium Infection Solution (for Arabidopsis) 储存条件:2-8℃ 产品简介: 本产品为工作液浓度,可只用于农杆菌介导的遗传转化。本产品添加了适宜浓度的MgCl2、MES和AS(临用前加入,终浓度150uM),其转化 优于重蒸水和MS培养基。农杆菌侵染液可以通过减小表面张力增加农杆菌在...
一分钟学会拟南芥叶片接种菌液,侵染实验, 01:07 【实验】酶解法制备植物原生质体制备 11:42 【实验】植物细胞骨架的染色与观察 12:47 【实验】植物含水量测定,水分测定仪,鲜重干重法,绝对含水量,相对含水量 08:48 【实验】小液流法测定植物水势 09:56 ...
农杆菌介导浸花法侵染拟南芥 一、实验目的 1.了解浸花法(floral tip)转化的机理；2.掌握拟南芥浸花法(floral tip)转化的技术 二、实验原理 拟南芥的花序大量产生时，将其在含有转化辅助剂silwet和蔗糖的农杆菌溶液中浸泡20秒，3-4周后对转化植株收种子。在含有合适抗生素的平板上对种子进行筛选，能够健康生长的...
关键词:农杆菌;蘸花法;侵染;拟南芥中图分类号:Q 949.748.3文献标识码:A在植物拟南芥的转化方法中蘸花法是Beehtol d等开创的[ 1] 。利用蘸花法不仅可以导入特定的基因结构到植物中,而且还可以作为一种随机突变基因的方法陋引。最初报道的此方法仅适用于拟南芥El i 。为探索拟南芥转化法的广泛性,使其能用来...
拟南芥 农杆菌 重组质粒 方法/步骤 1 转化农杆菌：GV3101农杆菌感受态从-80℃取出，冰上融化，加入2-5ul质粒，去郭老师实验室电激转化（拿杯，洗，，吹干，预冷，加菌液，对准方向插杯，AAgr程序，激完后看时间2.2hv、5.0s左右，每次需确定程序，需带的东西：镊子、枪、枪头、吹风机、纸、水、废液缸）...