1)经签定合格后的抗血清,以1:100比例加入1%的硫柳汞或5%的叠氮钠,使其最后浓度分别为0.01%或0.05%。 2)用无菌滴管将抗血清分装小管,每管装1ml左右。 3)-20℃以下保存,可保存2年以上。 4)如有条件可将血清冷冻干燥保存于4℃以下,保存时间更久
抗血清是含有特异性抗体的血清,通过免疫动物后收集血液并分离血清制备而成。制备方法包括选择动物、多次注射抗原、采血、分离血清。 抗血清指含有针对特定抗原的抗体血清。制备时,首先选择合适动物(如兔、羊),多次注射抗原以刺激免疫系统产生抗体。待抗体效价足够时采集血液,离心去除血细胞和纤维蛋白,获得含有抗体的血清...
抗原制备、动物免疫、采血、分离血清、抗体纯化、效价检测 抗血清制备的基本程序包括:首先选择合适的抗原,经过处理后免疫实验动物(如家兔)。免疫过程需要多次注射抗原,刺激动物免疫系统产生抗体。之后采集动物血液,静置后离心获取血清。血清中含有抗体,但还需纯化(常用盐析或层析法去除杂蛋白)。最后通过ELISA等方法测定抗体...
制备抗血清的第一步是制备抗原,通常是将目的蛋白与载体蛋白结合,形成复合物,以便更好地刺激免疫反应。免疫动物的选取 选择适当的动物作为免疫对象,通常选用大型哺乳动物,如兔、羊等,因为它们的免疫系统较为完善,能够产生高质量的抗血清。免疫程序的设计 根据抗原的性质和免疫动物的特点,设计适当的免疫程序,包括...
抗血清是由动物免疫某种抗原制备得到的一种免疫血清,其中包含了特异性抗体。抗血清制备的原理是通过注射一定量的特异性抗原到动物体内,使其产生特异性抗体,然后收集抗血清。二、材料和试剂 1.抗原:需要制备抗血清的特定抗原。2.兔、小鼠等动物。3.盐酸:用于调整兔抗血清的pH值。4.取血器:用于采集动物血液。5...
抗血清的制备是将制备好的免疫原按照一定的免疫程序接种给所选择的动物,该动物在含有多种抗原表位的抗原刺激下,体内多个B细胞克隆被激活并产生针对某一抗原多种不同表位的抗体,其混合物为多克隆抗体。采集动物血液,分离含有抗体的血清,即为抗血清。 一、免疫动物的选择 ...
抗血清的制备需要选择适龄、健壮、体重达标且无病原微生物感染的免疫动物。同时,应尽可能选择与抗原种属差异远的免疫动物。在抗血清需求量大的情况下,可以选择大型动物如马和绵羊;需求量小则可以选择小型动物如家兔、豚鼠和鸡等。此外,制备H血清时通常选用马,而制备R血清时则选用家兔。免疫途径选择 初次免疫时,...
免疫原常见问题:抗原纯度低、半抗原偶联失败、免疫原性弱。抗血清问题:效价低、特异性差、动物个体差异。解决方法:优化纯化步骤、调整偶联方法、使用合适佐剂;改进免疫程序、筛选高反应动物、吸收交叉抗体。 制备免疫原时,抗原纯度不足会影响抗血清特异性,需采用层析或电泳纯化。半抗原需与载体蛋白偶联,若偶联失败可更换...
一、细胞性免疫原的制备 1.绵羊红细胞抗原制备 采集新鲜绵羊红细胞注入无菌并带有玻璃珠的三角烧瓶内,充分摇动15分钟后除去纤维蛋白,再以无菌生理盐水洗涤3次,最后配成1×106/ml浓度的细胞悬液,即可应用。2.细菌抗原的制备 细菌抗原有菌体抗原和鞭毛抗原等,多选用典型菌株的液体或固体培养物经集菌后处理。鞭毛...