1. 在平皿中有三张成纤维细胞贴壁生长的盖片,在超净工作台内将一张盖片移入另一皿中继续培养,用作对照。 2. 在有两片的平皿内加100 μg/ml 的细胞松弛素B 4滴继续培养半小时。 3. 将用细胞松弛素B处理过的两张盖片取一张做染色处理,另一张用培养液洗五次(在平皿内换五次培养液,每次都要摇动)...
按上述操作分离下来的表皮,将其剪成碎片,置于0. 25%胰酶37℃振荡消化10 min,加入等体积的血清终止消化。充分吹打混匀成单细胞悬液,经 200目不锈钢滤网过滤后,以离心力1 800 g离心 8 min,弃去上清,再用PBS清洗1次,小心吸弃上清,加入K-SFM重悬混匀,锥虫蓝染色计数,按2 ✖105/cm2密度接种于培养皿,放入37...