慢病毒 shRNA 和 miRNA 分析 RNAi 载体的慢病毒和腺病毒递送 经过不断发展,病毒可以将核酸有效递送到细胞,病毒成为接触难转染的细胞类型以便实现蛋白过表达或敲低的方法。腺病毒、致癌反转录病毒和慢病毒已经广泛用于在细胞培养和体内递送(表1)。 表1.为您的实验选择最佳的病毒系统。
shRNA:小发卡或短发卡RNA(a small hairpin RNA or short hairpin RNA,shRNA)是一段具有紧密发卡环(tight hairpin turn)的RNA序列,常被用于RNA干扰沉默靶基因的表达。利用载体把shRNA导入细胞,载体中的U6启动子确保shRNA总是表达;shRNA的发卡结构可被细胞机制切割成siRNA,然后siRNA结合到RNA诱导沉默复合物上(RNA-...
慢病毒载体作为一种常用的基因传递工具,在基因沉默和调控方面发挥着重要作用。其中shRNA和microRNA初级转录物是两种常见的调控元素,它们在基因表达调节中具有各自的优势和特点。 shRNA是一种短小的RNA序列,能够…
将慢病毒载体的shRNA与慢病毒包装辅助质粒和包膜质粒共转染293T细胞，收集上清进行浓缩纯化，获取高滴度的慢病毒，相对于siRNA和shRNA质粒，shRNA慢病毒的感染范围更广，如依赖转染试剂难转染的细胞：原代细胞、悬浮细胞等，并可实现稳定、长效抑制基因表达。案例一 使用吉满生物shRNA慢病毒感染NOZ细胞，观察NOZ细胞的感...
源井生物在该研究中提供了RNPC1过表达慢病毒、shRNA慢病毒和空载体用于研究RNPC1与MST1/2 mRNA结合对EC细胞干性的抑制机制。源井生物拥有成熟的病毒包装体系与数百种细胞转染经验，可提供体外细胞感染用的浓缩病毒或动物体内使用的超纯化病毒。除此之外还有活力强，滴度高，能高效感染的慢病毒现货！RNPC1直接与MST1...
shRNA慢病毒载体构建及细胞系筛选 慢病毒基因组为双链RNA,但区别于一般的逆转录病毒,慢病毒具有更广的宿主范围,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。重组慢病毒载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I 型病毒)为基础发展起来的工具载体,其毒性基因已经被剔除并被外源目的基因所取代,属于假型病毒(一次性感染能力而无复制...
一、shRNA合成 一、序列合成 1.Top:5’酶切位点(CCGGT)+shRNA序列+CTCGAG+shRNA反向序列+TTTTT+酶切位点(G)3’ 2.Bottom:5’ 酶切位点(AATTC)+AAAAA+shRNA序列+CTCGAG+shRNA反向序列+酶切位点(A) 3’ 二、oligo退火形成duplex 1.磷酸化:混匀后,37° 30min磷酸化 ...
打开snapgene软件,以第一对引物为例,新建DNA序列,输入正向引物的序列F1。而后点击“引物→添加引物”,将R1作为引物序列输入,可得到 四.载体构建 使用上述引物,将RNA扩成cDNA后进行DNA连接,一个以pLKO.1为骨架的慢病毒载体就构建好了。具体步骤可见shRNA慢病毒载体合成步骤 - 简书。
C06030慢病毒干扰载体 LV-U6-Luci17-T2A-Neo50μg￥1,00015-25个工作日 吉玛基因慢病毒shRNA载体图谱 病毒包装及滴度测定 根据客户的需要克隆目的片段或shRNA序列到所需要的慢病毒载体,然后进行细胞转染及病毒生产。 产品提供形式 1 构建好的慢病毒载体第一次包装与纯化,滴度至少为1×10^8TU/ml。
即用型Lentivirus shRNA构建包装服务 Lentivirus shRNA服务特点: 1、适用于原代培养细胞,难以转染的各种细胞 2、可用于制备多种稳定沉默特定基因的细胞株 3、您通过GenePharma SupersilencingTM Vector方法筛选到有效的的基因沉默靶点,如果您需要构建慢病毒载体来满足实验需求 ...