④ 病毒纯度不够:与供应商联系确认慢病毒产品是否经过超速离心纯化!目前市场上很多低价慢病毒产品仅经过初步纯化,未使用超速离心机进行纯化;汉恒慢病毒产品全部经过超速离心纯化,尤其适合对杂质敏感的细胞株!其次,确定病毒感染MOI是否过高,降低MOI值,并在感染后的4h、8h、12h对细胞进行观察,若发现细胞状态变差...
2.预培英久杂客渐逐控约席设置不同MOI值的感染组,通常设立1,2,5,10,20,50,100的感染组别,...
目的 探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)慢病毒载体(lentivirus vector)体外转染嗅鞘细胞(OECs)并能稳定表达目的 蛋白的最佳感染复数(MOI).方法 构建GDNF-lentivirus,体外转染293T细胞,获得高滴度的慢病毒浓缩液,测定病毒滴度达2×108 TU/ml.不同MOI的情况下,GDNF-lentivirus体外转染OECs,Western blot检测GDNF的表达...
汉恒生物 等,但也有一些细胞不适合用慢病毒感染,可能更适合用腺病毒,可查阅文献,或咨询汉恒)2、慢病毒是否进行了正确的存储和稀释?3、感染操作问题(MOI是否合适?感染方法,感染及观察时间是否合适?)4、难感染细胞使用特殊方法感染5、可以添加助转染试剂polybrene增加感染效率#慢病毒 #慢病毒包装 #基因表达调控 +2 ...
1. 感染前一天接种,使得第二天细胞汇合度为30-40%。培养板可以是96孔板(只通过显微镜观察荧光)或是24孔板(通过流式或是定量PCR确定感染比例)。2. 设置不同MOI值的感染组,通常设立1,2,5,10,20,50,100的感染组别,各做两个孔,一个孔中加入终浓度为5 μg/ml的polybrene,另一组不...
慢病毒转染细胞,如何测moi值网友 1 最佳答案 回答者:网友 细胞系预实验-MOI 的确定预实验的目的是了解所操作细胞被慢病毒载体感染的容易程度,另一方面在一些情况下虽然慢病360问答毒已经感染进入细胞,但由于表达标记基因的启动子在该细胞内的表达效率不高,没能观察到感染现象。我们在预实验方案中加入不同启算沿损...
Moreover, OECs transfected by GDNF-lentivirus could long-term stably express GD%目的 探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)慢病毒载体(lentivirus vector)体外转染嗅鞘细胞(OECs)并能稳定表达目的 蛋白的最佳感染复数(MOI).方法 构建GDNF-lentivirus,体外转染293T细胞,获得高滴度的慢病毒浓缩液,测定病毒滴度达2×...
细胞系预实验-MOI 的确定预实验的目的是了解所操作细胞被慢病毒载体感染的容易程度,另一方面在一些情况下虽然慢病毒已经感染进入细胞,但由于表达标记基因的启动子在该细胞内的表达效率不高,没能观察到感染现象。我们在预实验方案中加入不同启动子的病毒进行感染,并且用定量PCR测定感染后细胞内整合病毒,这样即使病毒没有...