(1)Day 1,准备细胞:在 24 孔培养板接种若干孔处于对数生长期的目的细胞和平行对照293T细胞,铺板时细胞融合率为50%左右,每孔加入100 μL培养基,培养箱中培养至细胞贴壁(针对贴壁细胞),进行病毒感染时细胞的最佳融合度为 70% 左右。 (2) Day 2,准备病毒:4°C保存的病毒,取出后轻轻用移液器混匀; -80℃冻...
4. 实验步骤 (1)胰酶消化细胞,无血清培养基重悬,调整细胞密度为0.5~1×105/ml(根据情况酌情调整),每孔200ul细胞悬液接种至24孔板,培养箱培养过夜。次日进行慢病毒感染,此时细胞的融合度约为70%左右。 (2)准备病毒:取出4℃保存的病毒,使用瞬时离心机离心20秒(使病毒完全悬于离心管底部即可);如果是冻存在-80℃...
(1)准备慢病毒颗粒:计算所需慢病毒颗粒的量,将冻存在 -80℃ 的慢病毒颗粒取出,冰浴融化; (2)感染目的细胞:从培养箱中拿出细胞,置于显微镜下观察细胞生长状态及细胞融合度;如细胞状态较好,则开始实验: A. 用移液枪小心吸去 24 孔板中的旧培养液,加入新的完全培养液; B. 在细胞中分别加入计算好的慢病毒颗...
提高慢病毒感染细胞效率的实验步骤 1.提前一天细胞铺板提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 2.感染⑴将2ul的Envirus-LV用25μl无...
细胞片制备(通俗的说法是细胞爬片)是免疫荧光实验的第一步,细胞片的质量对实验的成败至关重要,原因很简单,如果发生细胞掉片,一切都无从谈起。用于免疫荧光实验的细胞可以是直接生长在盖玻片上的... 关于HPV问题,何亚习提出检查是防治感染重要步骤 HPV检查是防治人类乳头瘤病毒(HPV)感染的重要步骤。在这方面还有很多...
#实验视频#【慢病毒感染目的细胞实验步骤】 LNature期刊中文摘要的秒拍视频 小窗口 û收藏 67 4 ñ51 评论 o p 同时转发到我的微博 按热度 按时间 正在加载,请稍候...相关推荐 e刷新 +关注 笑孕了 06月17日 13:36 铲屎官带大脸猫hosico去医院检查身体,一套检查下来,全程乖巧...
第一代慢病毒载体为双质粒系统,基本保留了HIV的所有组件,产毒滴度低,复制缺陷,且存在产生复制能力的活性HIV病毒的可能;第二代慢病毒载体为三质粒系统,分为包装质粒、包膜质粒和载体质粒,其中使用水泡性口炎病毒糖蛋白(VSV-G)基因替代env基因,拓宽了病毒的感染宿主细胞范围,虽然三质粒降低了病毒重组的可能,但是由于其...
第一天:准备细胞将状态良好的目的细胞接种到24孔板中,细胞计数后,进行铺板,每孔加入500ul培养基。保证第二天感染病毒时融合效率达到30-40%。通常,24孔板内以 5-8*10^4cells/孔的密度铺板。第二天:病毒感染,换液1计算病毒加药量 选择合适MOI值,进行病毒感染。加药量计算方法:(细胞数×MOI值/病毒原液...
(1)准备慢病毒颗粒:计算所需慢病毒颗粒的量,将冻存在 -80℃ 的慢病毒颗粒取出,冰浴融化; (2)感染目的细胞:从培养箱中拿出细胞,置于显微镜下观察细胞生长状态及细胞融合度;如细胞状态较好,则开始实验: A. 用移液枪小心吸去 24 孔板中的旧培养液,加入新的完全培养液; B. 在细胞中分别加入计算好的慢病毒颗...