慢病毒( Lentivirus )载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷 I 型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装shRNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用...
在病毒包装过程中还要用到293T细胞,393T细胞是稳定表达SV40大T抗原的细胞系,可以增加穿梭质粒sv40 ori的活性,并且培养要求低、转染效率高。 最后慢病毒包装只需要把两个辅助质粒和穿梭质粒共同转染到293T细胞中,三个质粒分别表达病毒复制组装需要的元件,病毒在里面愉快的组装,然后病毒就这样包装出来了。©...
和元生物的慢病毒包装采用三质粒或是四质粒系统进行包装,将包装质粒、包膜质粒以及穿梭质粒共同转染至293...
维真生物采用2代慢病毒包装系统来制备慢病毒。该系统为三质粒系统,包括1个包装质粒(psPAX2)、1 个包...
CRISPR慢病毒系统包括两个载体: 1)gRNA慢病毒载体 gRNA慢病毒载体由慢病毒基因组序列和细菌质粒序列构成。细菌质粒序列含有一个Ampicillin抗性基因和一个高拷贝复制子pUCori。慢病毒基因组序列是从元件5’LTR开始,到3’LTR结束。 慢病毒基因组序列可容纳两个外源基因表达盒子:一个是目的基因表达盒子,另外一个是marker...
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细...
肝脏、肌肉、视网膜、造血干细胞、骨髓间充质干细胞、巨噬细胞等。慢病毒载体不表达任何HIV-1蛋白,免疫原性低,在注射部位无细胞免疫反应,体液免疫反应也较低,不影响病毒载体的第2次注射。泉州指南针生物提供病毒包装(包括慢病毒包装,腺病毒包装,腺相关病毒包装)等多种包装服务!
维真生物采用2代慢病毒包装系统,该系统包括包装质粒(psPAX2)、包膜质粒(pMD2G)、目的基因质粒和包装细胞(293T cell)。慢病毒制备流程包括两大部分:重组慢病毒的制备和重组慢病毒滴度测定。重组慢病毒制备流程如下:首先,在24孔细胞培养板中接种HEK293细胞,接着将慢病毒进行梯度稀释,随后进行病毒的...
HIV 21 是慢病毒中最具特征性的病毒,第一个慢病毒载体系统即以此病毒为基础进行构建的。慢病毒载体的构建原理就是将 HIV 21 基因组中的顺式作用元件 ( 如包装信号、长末端重复序列 ) 和编码反式作用蛋白的序列进行分离。载体系统包括包装成分和载体成分:包装成分由 HIV 21 基因组去除了包装、逆转录和整合所需...