i-sceI酶是一种限制性内切酶,它具有特定的酶切位点。i-sceI酶切原理是基于其识别并切割DNA中特定的核苷酸序列。i-sceI酶的酶切位点是5'-TAGGGATAACAGGGTAAT-3',它会识别这一特定的序列并在其特定的位置上切割DNA链。这种酶切原理使得i-sceI酶在分子生物学实验中被广泛应用,用于DNA片段的定向切割和重组。通过...
最常用的方法是基于Red同源重组系统和核酸内切酶I-SceI的切割筛选作用, 其原理主要通过两步连续的同源重组实现无痕敲除, 即先用带筛选标记的抗性基因和核酸内切酶I-SceI识别序列的片段敲除目的基因片段; 再通过完全与目的基因上下游同源的片段同源重组, 依靠诱导核酸内切酶I-SceI表达, 切割筛选去除未进行重组的菌株, 达...